巢式引物的概念
中文名稱巢式引物英文名稱nested primer定 義為巢式聚合酶鏈反應所設計的引物,第二組引物是在第一組引物擴增得到的產物序列范圍內設計的。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)......閱讀全文
巢式引物的概念
中文名稱巢式引物英文名稱nested primer定 義為巢式聚合酶鏈反應所設計的引物,第二組引物是在第一組引物擴增得到的產物序列范圍內設計的。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
巢式PCR
巢式PCR可應用于:(1)病毒檢測;(2)測序分析;(3)低表達基因檢測。實驗方法原理由于巢式PCR反應有兩次PCR擴增,從而降低了擴增多個靶位點的可能性(因為與兩套引物都互補的引物很少)增加了檢測的敏感性;又有兩對PCR引物與檢測模板的配對,增加了檢測的可靠性。?由于第二套引物位于第一輪PCR產物
巢式PCR
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 由于巢式PCR反應有兩次PCR擴增,從而降低了擴增多個靶位點的可能性(因為與兩套引物都互補的引物很少)增加了檢測的敏感性;又有兩對P
巢式PCR
實驗方法原理 由于巢式PCR反應有兩次PCR擴增,從而降低了擴增多個靶位點的可能性(因為與兩套引物都互補的引物很少)增加了檢測的敏感性;又有兩對PCR引物與檢測模板的配對,增加了檢測的可靠性。 由于第二套引物位于第一輪PCR產物內部,而非目的片斷包含兩套引物結合位點的可能性極小,因此第二套引
T細胞歸巢的概念
中文名稱T細胞歸巢英文名稱T cell homing定 義T細胞借助其表面歸巢受體與胸腺或外周淋巴器官內皮細胞表面地址素相互作用,定向遷移至淋巴組織的過程。應用學科免疫學(一級學科),免疫系統(二級學科),免疫細胞(三級學科)
巢式PCR反應
巢式PCR通過兩輪PCR反應,使用兩套引物擴增特異性的DNA片斷。第二對引物的功能是特異性的擴增位于首輪PCR產物內的一段DNA片斷。
巢式PCR實驗
巢式PCR標簽: 巢式 PCR巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR),使用兩對(而非一對)PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通PCR相似。第二對引物稱為巢式引物(因為他們在第一次PCR擴增片段的內部)結合在第一次PCR產物內部,使得第二次PCR擴增片段短于第一次擴增。實驗方
巢式PCR的定義
巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR),使用兩對(而非一對)PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通 PCR相似。第二對引物稱為巢式引物(因為他們在第一次PCR擴增片段的內部)結合在第一次PCR產物內部,使得第二次PCR擴增片段短于第一次擴增。巢式PCR的好處在于,如果第一
空巢綜合癥的概念
據說“空巢”一說最初起源于一則童話:在一片茂密的山林里,棲息著很多小鳥,它們有的在翩翩起舞,有的在歌唱,然而在這片山林里,卻有一對老鳥趴在窩中,它們心中感嘆著:孩子們的翅膀硬了,都飛走了,剩下我們兩個老的好凄涼、好孤單…… 單從字義上講,空巢就是“空寂的巢穴”,比喻小鳥離巢后的情景,現在被引申
淋巴細胞歸巢的概念
淋巴細胞歸巢是以淋巴細胞表面的歸巢受體與血管內皮細胞表面的黏附分子——血管地址素的相互作用為基礎定向移動的一種遷移活動,在淋巴細胞的成熟、再循環以及向炎癥部位滲出過程中均會發生。
3巢式PCR的步驟
第一步:目標的DNA模板藍色的第一對引物結合。第一對引物也可能結合到其他具有相似結合位點的片段上并擴增多種產物。但只有一種產物是目的片段(圖中未顯示可能的多種產物)。 第二步:使用圖中紅色標記的第二套引物對第一輪PCR擴增的產物進行第二輪PCR擴增。 由于第二套引物位于第一輪PCR產物內部,
簡并引物的概念
簡并引物是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基序列可能性引物的混合物。PCR為了增加特異性,可以參考密碼子使用表,根據不同生物的堿基使用偏好,減少簡并性。簡并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡量選擇簡并性小的氨基酸,并避免引物3’末端簡并。
引物修補的概念
中文名稱引物修補英文名稱primer repair定 義當DNA模板受損時,可根據其損傷情況,以一套或幾套引物借助核酸聚合酶的作用合成新的互補核酸鏈,以修復損傷形成的錯誤序列的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
引物延伸的概念
中文名稱引物延伸英文名稱primer extension定 義從與模板(RNA或DNA)結合的引物3′-OH端開始,在核酸聚合酶的作用下,按照堿基配對的原則,逐個連上核苷酸,由5′→3′方向合成與模板互補鏈的過程。該反應可用于聚合酶鏈反應、單核苷酸多態性檢測等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學
反向引物的概念
反向引物(下游引物)是沿著正鏈進行延長的。體外擴增DNA,雙螺旋是部分或完全打開的,不存在岡崎片段,也不會一段段延長,理論上正反引物都是不間斷延長的,和體內DNA自我復制是有區別的。
正向引物的概念
中文名稱正向引物英文名稱forward primer定 義處于DNA雙鏈上游的引物。如用于測序,則從5′向3′方向讀出DNA正鏈的序列。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
淋巴細胞歸巢受體的概念
淋巴細胞歸巢受體是指在淋巴細胞歸巢過程中,淋巴細胞表面的能夠和血管內皮細胞表面粘附分子結合,定位淋巴細胞歸巢組織的表面分子。
引物步移的概念
中文名稱引物步移英文名稱primer walking定 義一種長鏈DNA測序的策略。根據已測出的序列結構設計測序引物,按第一輪測序得出的新序列,再設計引物進行第二輪測序,如此重復,直至獲得全序列。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
通用引物的概念和作用
通用引物是一般和載體多克隆位點兩旁的序列匹配,或者是與載體里面的一些啟動、終止元件匹配。這樣不管載體插入什么DNA片段,都可以用通用引物擴出來。通用引物可以用來測序,但是只是“通用”,也不是萬能的。
隨機引物的概念和用途
隨機引物是指當特定mRNA由于含有使逆轉錄酶終止的序列而難于拷貝其全長序列時,可采用隨機六聚體這一不特異的引物來拷貝全長mRNA。用此種方法時,體系中所有RNA分子全部充當了cDNA第一鏈模板,PCR引物在擴增過程中所需要的特異性通常用此引物合成的cDNA。
何謂巢式聚合酶鏈反應?
巢式聚合酶鏈反應(nested polymearse chain reaction, nPCR)也稱套式PCR。在這種技術中,首先用一對外引物進行第1輪PCR,然后再使用第1對引物擴增的DNA序列內部的一對引物再次擴增,所以稱為巢式PCR。由于使用了兩對引物并且進行了兩輪擴增反應,因此試驗的
序列特異性引物的概念
中文名稱序列特異性引物英文名稱sequence specific primer;SSP定 義一種測定基因突變的方法。即利用針對點突變的2個等位特異性寡核苷酸(ASO)引物(A、B標記其中之一)與另一共同引物(C)組成引物系統;在引物延伸時,A與B同時競爭靶序列上同一復性位點,擴增反應后,經凝膠電泳
序列特異性引物的概念
中文名稱序列特異性引物英文名稱sequence specific primer;SSP定 義一種測定基因突變的方法。即利用針對點突變的2個等位特異性寡核苷酸(ASO)引物(A、B標記其中之一)與另一共同引物(C)組成引物系統;在引物延伸時,A與B同時競爭靶序列上同一復性位點,擴增反應后,經凝膠電泳
PCR中正向引物和反向引物的概念和具體作用
正向引物和反向引物是相對的,通常以一個雙鏈DNA(上面的那條鏈)的上游結合部位稱為正向引物,是從左到右的方向,也就是5-3的方向,而下面那條互補鏈的下游結合部位稱為反向引物。其方向是從右到左的,因為下面的鏈的方面從左到右是3-5,從右到左就是5-3了,PCR的擴增的確是一條引物就可以擴增了。反向引物
巢式PCR(Nested-PCR)定義、原理和步驟
巢式PCR的定義巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR),使用兩對(而非一對)PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通 PCR相似。第二對引物稱為巢式引物(因為他們在第一次PCR擴增片段的內部)結合在第一次PCR產物內部,使得第二次PCR擴增片斷短于第一次擴增。巢 式PCR的好處
巢式聚合酶鏈反應的方法及應用介紹
中文名稱巢式聚合酶鏈反應英文名稱nested PCR定 義由兩次相繼進行的聚合酶鏈反應組成的一種PCR技術,其中第二次PCR是在第一次PCR反應產物序列范圍內進行擴增的,借以提高PCR的成功率和分析的特異性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
半巢式聚合酶鏈反應的方法及應用介紹
中文名稱半巢式聚合酶鏈反應英文名稱semi-nested PCR;hemi-nested PCR定 義第二次PCR反應的引物只有一個,另一個是用第一次PCR反應的一個引物的一種PCR技術。此法是在無法獲得理想的第二次引物時采用。對提高靈敏度和特異性仍有助益。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科)
分級式梯度的概念
中文名稱分級式梯度英文名稱stepwise gradient定 義密度或濃度的變化呈階梯式的不連續遞增。分級式梯度溶液用于離心分離、層析樣品洗脫等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
淋病的實驗室診斷和藥敏分析(三)
?????? (2)PCR引物的設計??????? 由于淋球菌隱蔽質粒CPPB基因在淋球菌染色體中和4.2kb隱蔽質粒中都有存在,同時在96%的淋球菌中都有該隱蔽質粒,因此很多PCR引物設計在CPPB基因區。???????? 靶基因 引物序列 片段長度(bp)CPPB NG1 5′GTT TGG C
漸進式進化的概念
中文名稱漸進式進化英文名稱progressive evolution定 義認為進化是定向的一種錯誤的拉馬克進化學說。應用學科遺傳學(一級學科),進化遺傳學(二級學科)