RNA干擾治療腫瘤病的方法介紹
腫瘤是多個基因相互作用的基因網絡調控的結果,傳統技術誘發的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長,而RNAi可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性,設計針對這一區段序列的dsRNA分子,只注射一種dsRNA即可以產生多個基因同時剔除的表現,也可以同時注射多種dsRNA而將多個序列不相關的基因同時剔除。Maen等應用RNAi技術成功地阻斷了MCF7乳腺癌細胞中一種異常表達的與細胞增殖分化相關的核轉錄因子基因Sp1的功能。盡管化療能有效消滅腫瘤細胞,卻不能有效的靶向腫瘤細胞,因此,在治療過程中導致很多正常細胞的死亡,實現靶向腫瘤細胞同樣也是以 RNA 干擾為基礎的腫瘤治療的重要發展方向。已有很多針對不同基因的RNA干擾在體內和體外有效地抑制了腫瘤細胞的生長,這些目的基因包括:Bcl-2、survivin、EGFR、VEGF等。RNA干擾代替傳統反義核酸進行轉錄后基因沉默,能高效地特異性抑制目的基因......閱讀全文
RNA干擾治療腫瘤病的方法介紹
腫瘤是多個基因相互作用的基因網絡調控的結果,傳統技術誘發的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長,而RNAi可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性,設計針對這一區段序列的dsRNA分子,只注射一種dsRNA即可以產生多個基因同時剔除的表現,也可以同時注射多種dsR
RNA干擾用于腫瘤病的治療
腫瘤是多個基因相互作用的基因網絡調控的結果,傳統技術誘發的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長,而RNAi可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性,設計針對這一區段序列的dsRNA分子,只注射一種dsRNA即可以產生多個基因同時剔除的表現,也可以同時注射多種dsR
簡述RNA干擾技術對腫瘤病的治療
腫瘤是多個基因相互作用的基因網絡調控的結果,傳統技術誘發的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長,而RNAi可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性,設計針對這一區段序列的dsRNA分子,只注射一種dsRNA即可以產生多個基因同時剔除的表現,也可以同時注射多種d
PNAS:用RNA干擾來治療惡性腫瘤
套細胞淋巴瘤(MCL)被認為是最具侵襲性的血癌,中位生存時間僅為七年,目前可用的治療方法很少。每年有三千美國人被診斷為MCL,盡管用于身體其他部位轉移瘤的個性化療法已經取得了一定進展,但是,系統性的將治療藥物傳遞到癌細胞,對世界癌癥研究來說仍然是個挑戰。 最近,以色列特拉維夫大學(TAU)的一
RNA干擾治療遺傳性疾病的方法介紹
美國西北大學的Carthew R W和日本基因研究所的Ishizuka A等人發現RNAi同脆性X染色體綜合征(與FMR-1基因異常有關的導致智力低下的染色體病)之間的關系密切,揭示了與RNAi相關機制的缺陷可能導致人類疾病的病理機制。遺傳性疾病的RNAi治療成為當今研究RNAi的又一大熱點。
RNA干擾制備方法
化學合成許多國外公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成siRNA。主要的缺點包括價格高,定制周期長,特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高,為一個基因合成3—4對siRNAs 的成本就更高了,比較常見的做法是用其他方法篩選出最有效的序列再進行化學合成。最適用于:已經找到最有效的siRNA的情況
RNA干擾治療病毒性疾病的方法
加州大學洛杉磯分校和加州理工學院的研究人員開發出使用RNAi技術來阻止艾滋病病毒進入人體細胞。這個研究小組設計合成的lenti病毒載體引入siRNA,激發RNAi使其抑制了HⅣ-1的coreceptor-CCR5進入人體外周T淋巴細胞,而不影響另一種HⅣ-1主要的coreceptor-CCR4,從而
關于小干擾RNA的RNA激活介紹
已經發現dsRNA還可以激活基因表達,這種機制被稱為“小RNA誘導的基因激活”或RNAa。已經顯示靶向基因啟動子的dsRNA誘導相關基因的有效轉錄激活。使用合成的dsRNA在人細胞中證明RNAa,稱為“小活化RNA”(saRNA)。尚不清楚RNAa是否在其他生物體中是保守的。
RNA干擾主體實驗的方法和過程介紹
siRNA表達載體構建好后,即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于:成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低(低于70%),則應采用腺病毒或慢病毒載體,利用病毒載體的高感染率、高表達特性,更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
RNA干擾回復實驗的方法和原理介紹
RNA干擾回復實驗,主要是為了說明Off-target效應。Off-target效應Off-target effects(脫靶效應)最早由Dharmacon科學家Jackson和他的同事們提出(Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can Induce
產生RNA干擾RANi-的方法
4 產生RANi 的方法產生RANi 的方法主要有體外合成和體內合成siRNA 法。將siRNA 導入細胞的方法又分為微量注射法、電穿孔法、浸泡法、工程菌喂養法、轉基因法和病毒感染法等。Harborth 等[14 ]設計體外合成21nt siRNA 的方法是:在基因庫中尋找靶向基因的mRNA 序列,
RNA干擾回復實驗介紹
RNA干擾回復實驗,主要是為了說明Off-target效應。Off-target效應Off-target effects(脫靶效應)最早由Dharmacon科學家Jackson和他的同事們提出(Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can Induce
RNA干擾主體實驗介紹
siRNA表達載體構建好后,即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于:成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低(低于70%),則應采用腺病毒或慢病毒載體,利用病毒載體的高感染率、高表達特性,更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
RNA干擾主體實驗介紹
siRNA表達載體構建好后,即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于:成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低(低于70%),則應采用腺病毒或慢病毒載體,利用病毒載體的高感染率、高表達特性,更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
RNA干擾主體實驗介紹
siRNA表達載體構建好后,即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于:成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低(低于70%),則應采用腺病毒或慢病毒載體,利用病毒載體的高感染率、高表達特性,更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
RNA干擾實驗技術介紹
通過生化和遺傳學研究表明,RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段,加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明;一個稱為Dicer
關于RNA干擾的發現介紹
RNAi是在研究秀麗新小桿線蟲(C. elegans)反義RNA(antisense RNA)的過程中發現的,由dsRNA介導的同源RNA降解過程。1995年,Guo等發現注射正義RNA(sense RNA)和反義RNA均能有效并特異性地抑制秀麗新小桿線蟲par-1基因的表達,該結果不能使用反義
腫瘤的治療方法介紹
由于常規治療腫瘤的不足,大多數患者無法避免復發或轉移的發生,今天在一種新的、療效顯著的癌癥治療模式下,細胞免疫治療,就是利用生物技術和生物制劑從患者體內獲取免疫細胞,在體外培養并放大后輸給患者,刺激和增強人體自身免疫功能的方法,從而達到治療腫瘤的目的。1、特異性免疫治療:常用于治療性腫瘤疫苗,其中大
RNA干擾主體實驗的相關介紹
siRNA表達載體構建好后,即可進行RNA干擾主體實驗。 RNA干擾主體實驗的重點在于: 成功將siRNA表達載體導入目的細胞 如果目的細胞的質粒轉染效率較低(低于70%),則應采用腺病毒或慢病毒載體,利用病毒載體的高感染率、高表達特性,更好地開展RNA干擾主體實驗。 設置好分組和對照
關于小干擾RNA的發現介紹
siRNA最早是由英國的大衛·包孔博(David Baulcombe)團隊發現,是植物中的轉錄后基因沉默(post-transcriptional gene silencing;PTGS)現象的一部分,其研究結果發表于《科學》。2001年,湯瑪士·涂許爾(Thomas Tuschl)團隊發現合成
關于小干擾RNA的基本介紹
小干擾RNA(Small interfering RNA;siRNA)有時稱為短干擾RNA(short interfering RNA)或沉默RNA(silencing RNA),是一個長20到25個核苷酸的雙股RNA,在生物學上有許多不同的用途。已知siRNA主要參與RNA干擾(RNAi)現象
關于RNA干擾的作用機制介紹
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內,并利用宿主細胞進行轉錄時,常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應,其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA(大約21~23 bp),即siRNA。siRNA在細胞
關于小干擾RNA的結構介紹
siRNA具有明確定義的結構:具有磷酸化5'末端的短(通常20至24bp)雙鏈RNA(dsRNA)和具有兩個突出核苷酸的羥基化3'末端。該切酶酶催化生產的siRNA由長的dsRNA和小發夾RNA。siRNA也可以通過轉染引入細胞。由于原則上任何基因都可以被具有互補序列的合成siR
RNA干擾回復實驗的基本介紹
RNA干擾回復實驗,主要是為了說明Off-target效應。 Off-target效應 Off-target effects(脫靶效應)最早由Dharmacon科學家Jackson和他的同事們提出(Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can I
RNA干擾實驗技術介紹(二)
dsRNA消化法的主要優點在于可以跳過檢測和篩選有效siRNA序列的步驟,為研究人員節省時間和金錢(注意:通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜)。不過這種方法的缺點也很明顯,就是有可能引發非特異的基因沉默,特別是同源或者是密切相關的基因。現在多數的研究顯示 這種情況通常不會造成影
RNA干擾回復實驗原理介紹
RNA干擾回復實驗,主要是為了說明Off-target效應。Off-target效應Off-target effects(脫靶效應)最早由Dharmacon科學家Jackson和他的同事們提出(Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can Induce
RNA干擾實驗技術介紹(一)
通過生化和遺傳學研究表明,RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段,加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明;一個稱為Dic
治療心臟腫瘤的方法介紹
手術切除是治療心臟腫瘤的首選治療方法,其預后取決于腫瘤的病理類型及侵及范圍。良性心臟腫瘤只要能夠切除,預后是良好的,黏液瘤復發率較低。惡性心臟腫瘤手術治療可以明確腫瘤性質,解除機械梗阻,緩解患者癥狀,但幾乎所有的心臟惡性腫瘤都預后不良,外科治療僅僅是姑息手術,易復發,平均生存時間在3個月至1年;
治療胰腺腫瘤的方法介紹
1.胰腺肉瘤 首選手術治療。胰頭部腫瘤行胰十二指腸切除術,胰體尾部腫瘤行胰體尾脾切除術,侵及胃、結腸等周圍臟器時可合并部分胃、結腸切除。胰腺肉瘤很少有遠處轉移或淋巴結轉移。 2.胰腺囊腺瘤 手術是胰腺囊性腫瘤惟一的治療方法。囊腺瘤常有完整的包膜,且好發于胰腺體尾部,小的囊腺瘤可予以摘除;大
腎腫瘤的治療方法介紹
1、錯構瘤 小于4cm可不予處理。錯構瘤較大者可行剜除術或部分腎切除術,瘤體較大、腎結構被破壞、功能喪失者,可以考慮行腎切除術。 2、各類腎惡性腫瘤 確診后均應早期施行根治性腎切除術,包括腎周圍脂肪組織、腹主動脈旁淋巴結、大部輸尿管及周圍組織、受累的腎上腺;如腎靜脈內瘤栓已延及腔靜脈則應將