昆明植物所在植物基因組印跡研究中取得進展
蓖麻基因組印跡以及其甲基化分析 基因組印記 (genetic imprinting)是一種非常重要的表觀遺傳學現象之一。在配子或合子發育過程中，來自親本的等位基因或染色體發生了差異的表觀修飾，導致了親本等位基因的差異表達（即印跡基因）。在植物中基因組印跡主要發生在被子植物的三倍體胚乳組織中，且在胚乳以及種子的發育過程中扮演者重要的作用，但由于擬南芥胚乳隨著種子發育很快消失，所以長期以來一直很難解析雙子葉植物基因印跡對胚乳表型影響的生物學意義。 最近，中國科學院昆明植物研究所劉愛忠研究組的博士生徐偉利用典型雙子葉胚乳型種子蓖麻，發展了嶄新的研究體系，鑒別了大量新穎的印跡基因，通過系統分析植物印跡基因在進化過程的保守性發現了植物印跡基因具有很強的物種特異性。特別是通過基因組的甲基化分析，發現了基因印跡的發生和DNA甲基化密切相關，強烈暗示著DNA甲基化很可能是印跡基因發生的主要驅動力之一。 該研究不但極大地豐富了植物......閱讀全文
昆明植物所在植物基因組印跡研究中取得進展
蓖麻基因組印跡以及其甲基化分析 基因組印記 (genetic imprinting)是一種非常重要的表觀遺傳學現象之一。在配子或合子發育過程中，來自親本的等位基因或染色體發生了差異的表觀修飾，導致了親本等位基因的差異表達（即印跡基因）。在植物中基因組印跡主要發生在被子植物的三倍體胚乳組織
研究發現植物印跡基因有較強物種特異性
記者日前從中科院昆明植物所獲悉，該所劉愛忠研究組博士生徐偉利用典型雙子葉胚乳型種子蓖麻，發展了嶄新的研究體系，并鑒別出大量新穎的印跡基因。相關成果在線發表于《核酸研究》雜志。 據介紹，基因組印記是一種非常重要的表觀遺傳學現象。在配子或合子發育過程中, 來自親本的等位基因或染色體發生差異性的表觀
印跡法植物氣孔檢測實驗
實驗方法原理把有機溶膠涂在植物的表面，膠體風干后就凝成薄膜，這膜就印有表皮組織各細胞的邊界痕跡，從而顯示出氣孔的開閉情況，此法除用來觀測氣孔外，還可用于觀測表皮組織上的細胞，茸毛以及蜜腺、蜜盤、刺、鱗片等。實驗材料植物葉片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
印跡法植物氣孔檢測實驗
實驗方法原理把有機溶膠涂在植物的表面，膠體風干后就凝成薄膜，這膜就印有表皮組織各細胞的邊界痕跡，從而顯示出氣孔的開閉情況，此法除用來觀測氣孔外，還可用于觀測表皮組織上的細胞，茸毛以及蜜腺、蜜盤、刺、鱗片等。實驗材料植物葉片試劑、試劑盒脫脂棉牛皮膠甲苯石蠟儀器、耗材顯微鏡目鏡測微尺載玻片蓋玻片磨口玻璃
印跡法植物氣孔檢測實驗
實驗方法原理 把有機溶膠涂在植物的表面，膠體風干后就凝成薄膜，這膜就印有表皮組織各細胞的邊界痕跡，從而顯示出氣孔的開閉情況，此法除用來觀測氣孔外，還可用于觀測表皮組織上的細胞，茸毛以及蜜腺、蜜盤、刺、鱗片等。實驗材料 植物葉片試劑、試劑盒 脫脂棉牛皮膠甲苯石蠟儀器、耗材 顯微鏡目鏡測微尺載玻片蓋玻片
outhern印跡及基因組DNA雜交技術實驗——Southern－印跡
實驗方法原理硝酸纖維膜或尼龍濾膜對單鏈DNA的吸附能力很強，當電泳后凝膠經過DNA變性處理，覆以上述濾膜，再于其上方壓上多層干燥的吸水紙，借助它對深鹽溶液的上吸作用，凝膠上的單鏈DNA將轉移到濾膜上。轉移是原位的，即DNA片段的位置保持不變。轉移結束后，經過80℃烘烤的DNA，將原位地固定于膜上。實
基因組印跡的分子機理
從目前研究結果來看，基因印跡的發生主要有以下兩種機理： 一方面，研究發現，基因組印跡的分子機理與印跡基因DNA中胞嘧啶甲基化尤其是CpG島的甲基化密切相關，胞嘧啶甲基化是DNA的一種共價修飾。另外還有特殊的染色質結構和反義轉錄產物等可能都是基因印跡產生和維持的重要因素。 基因印跡中，卵子和精
Southern－印跡實驗——印跡法
Southern印跡法是將DNA片段從電泳凝膠中轉移至膜支持物上，使DNA片段固定，因此該膜半永久性地重現出凝膠電泳的帶型。實驗方法原理本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設計的，稍作修改后同樣可用于硝酸纖維素膜方法。實驗材料DNA試劑、試劑盒HClNaClTrisNaOH
Southern印跡及基因組DNA雜交技術實驗
Southern 印跡 放射性標記的探針與固定化核酸進行雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硝酸纖維膜或尼龍濾膜對單鏈DNA的吸附能力很強，當電泳后凝膠經過DNA變
Southern印跡及基因組DNA雜交技術實驗
實驗材料 基因組 DNA試劑、試劑盒 限制性緩沖液儀器、耗材 瓊脂糖凝膠實驗步驟 1. 7~20 μg 基因組 DNA 稀釋到 500 μl 合適的限制性緩沖液中。4℃ 過夜。2. 每管加 10~20 單位限制性酶。孵育 4~6 小時。10 μl 消化液在小瓊脂糖凝膠上電泳檢測消化的程度。如果需要，
Southern印跡及基因組DNA雜交技術實驗
放射性標記的探針與固定化核酸進行雜交試劑、試劑盒預雜交液SSCSDS儀器、耗材硝酸纖維素濾膜實驗步驟1. 準備適合即將進行的工作的雜交溶液。每平方厘米硝酸纖維素濾膜或尼龍膜大約需要 0.2 ml 預雜交液。預雜交液：用于檢測低豐度序列：或者6x SSC ( 或 6x SSPE)5 x Denhard
Northern印跡的制備和Northern印跡
Northern印跡的制備 預備： 1.按下述步驟，每泳道加10～20μg總RNA或 0.5～1μgpoly(A)+RNA進行甲醛/ 瓊脂糖凝膠電泳，將凝膠放在紫外線透照儀上，旁邊置一標尺進行拍照。 a. 總RNA（10～20μg）用下列溶液在65℃溫育5min：
植物基因轉化技術
相關知識植物基因轉化技術是指將外源基因導入植物細胞或組織，獲得轉基因植物的技術。植物基因轉化技術總體上可分為兩大類：1 以生物體為介導的基因轉移法；2 DNA直接導入法。前者如農桿菌介導法，植物病毒介導法；后者如基因槍法、電擊法、聚乙二醇法、脂質體法及花粉管通道法。其中應用最廣的是根癌農桿菌介導法。
植物轉基因技術
1)農桿菌介導轉化法 將外植體放入含有外源基因的農桿菌(Agrobacteriumtume／ociens)菌液中浸泡，然后轉入共培養基，再轉入篩選培養基誘導抗性愈傷組織和抗性芽，生根后的抗性植株移栽至營養缽生長。(2)基因槍法 又稱微彈轟擊法。其基本原理是將外源DNA黏附在微小的金粒或鎢粒表面，然后
植物雌雄－基因可辨
大多數人不知道的一點是，我們在超市里購買的黃瓜是純粹的“女性”——它們由精心雜交培育的、只生產雌花的植株生長而來。長久以來，農民們都知道“女性”因素對于農作物成功的重要性：雌花比例越高，種子和果實的產量越大。最近，科學家揭示了植物性別決定的分子基礎。 在《科學》上發表的一篇文章中，以色列巴伊
基因槍活體植物基因轉染
本實驗所用基因傳遞系統（基因槍）原理：低壓基因遞送系統（GDS-80 基因槍 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1），根據火箭噴嘴原理和空氣動力學原理設計，是用于傳遞生物微粒進入靶細胞的一種新型系統。如圖1中所示，當左側出現輸入氣體壓力時（如：氦氣），兩個腔室之間將形成巨
GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡1
[實驗原理]免疫印跡（Western blotting 或 Immunoblotting）一般由凝膠電泳、樣品的印跡和免疫學檢測三個部分組成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，使待測樣品中的蛋白質按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質轉移到一種固相支持物上，用得最多的材料
GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡2
第二部分：免疫印跡染色[儀器、材料與試劑](一)儀器與器具1．電泳儀(要求為大電流低電壓)2．電泳轉移槽及轉移夾3．水平搖床4．小塑料盒5．鑷子6．搪瓷盤(二)材料1．醋酸纖維膜2．濾紙3．一次性塑料手套(三)試劑1．轉移電泳緩沖液25mmo1／L Tris，192mmo1／L 甘氨酸，20％甲醇，
蛋白印跡法有什么作用？可用來基因檢測么
蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。 與Southern Blo
如何選擇蛋白印跡實驗中的印跡膜？
硝酸纖維素膜（NC膜）是蛋白和核酸雜交最常用的印跡膜，是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下，大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起，雖然這其中的機制還不是十分清楚，但由于硝酸纖維素膜的這個特性，而且易于封閉非特異性結合，從而得到了廣泛的應用。目
如何選擇蛋白印跡實驗中的印跡膜
硝酸纖維素膜（NC膜）是蛋白和核酸雜交zui常用的印跡膜，是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下，大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起，雖然這其中的機制還不是十分清楚，但由于硝酸纖維素膜的這個特性，而且易于封閉非特異性結合，從而得到了廣泛的
植物基因轉化常用方法
一 植物遺傳轉化的方法 植物遺傳轉化技術可分為兩大類：一類是直接基因轉移技術，包括基因槍法、原生質體法、脂質體法、花粉管通道法、電激轉化法、PEG介導轉化方法等，其中基因槍轉化法是代表。另一類是生物介導的轉化方法，主要有農桿菌介導和病毒介導兩種轉化方法，其中農桿菌介導的轉化方法操作簡便、成本低、轉
植物基因轉化常用方法
一. 植物遺傳轉化的方法 植物遺傳轉化技術可分為兩大類：一類是直接基因轉移技術，包括基因槍法、原生質體法、脂質體法、花粉管通道法、電激轉化法、PEG介導轉化方法等，其中基因槍轉化法是代表。另一類是生物介導的轉化方法，主要有農桿菌介導和病毒介導兩種轉化方法，其中農桿菌介導的轉化方法操作簡便、成本低、轉
轉基因植物中的篩選基因
基因工程（DNA重組技術）是在離體條件下對不同生物的遺傳物質（DNA）進行人為“加工”，并按照人們的意愿重新組合，以改變生物的性狀和功能，然后再通過適當的載體將重組DNA轉入生物體或細胞內，并使其在生物體內或細胞中表達，從而獲得新的生物機能。這種利用基因工程技術獲得的植物一般稱為“基因工程植物”。自
Southern－印跡實驗
實驗方法原理?本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設計的，稍作修改后同樣可用于硝酸纖維素膜方法。實驗材料?DNA試劑、試劑盒?HClNaClTrisNaOHSSC溴化乙錠儀器、耗材?電泳儀紫外透射儀實驗步驟 一、向上毛細管轉移法的轉移疊層系統：：圖一、向上毛細管轉移法的轉移
印跡轉移電泳
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southren創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southren印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northe
Southern印跡技術
實驗原理:Southern印跡是將DNA片斷從電泳凝膠上直接轉移至膜支持物（如硝酸纖維素膜、尼龍膜）上，使DNA片斷固定的技術。先將DNA經限制性內切酶消化成一系列片段，進行瓊脂糖凝膠電泳，各片段因分子量不同而彼此分開，然后經堿處理凝膠，使DNA的片段被變性、中和并通過毛細作用在高鹽緩沖液中在原位將
Southern－印跡實驗
印跡法 堿性緩沖液法 向下毛細管轉移法 電轉印法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設
Western印跡法
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器：高壓鍋、玻璃勻漿
Northern印跡和總RNA雜交實驗——Northern印跡分析
試劑、試劑盒甲醛凝膠溶液RNA 電泳緩沖液儀器、耗材凝膠模梳齒凝膠用具實驗步驟1. 用肥皂和水徹底清洗凝膠模，梳齒和凝膠用具。2. 準備甲醛凝膠溶液。甲醛凝膠溶液（300 ml 1％ 瓊脂糖凝膠）：瓊脂糖，3.0 g10x RNA 電泳緩沖液，30 ml? ???Milli-Q 或用玻璃器皿蒸餾過的