體外功能學實驗開發的一般原則
本文從整體角度分析生物學功能評價和檢測分析方法的雙重間接性,并以最基本的生物學功能實驗,配 體受體結合相關實驗為實例,介紹采用ELISA技術競爭法進行配體受體結合相關實驗方法學開發的一般過程,區分以樣品以親和力大小比較和定量檢測為使用目的兩個方面具體應用及方法質量的初步評價,并討論采用同不同檢測技術進行功能學實驗和定量實驗的通用原則。生物學功能評價和檢測分析方法的雙重間接性 生物學檢測方法研究生物活性物質之間相互作用及其影響,或者利用生物活性物質之間相互作用進行定量,是生命科學研究領域和藥物研發過程中必不可少的工具。有別于色譜質譜拉曼光譜等儀器分析方法,生物學檢測方法往往是間接的,其間接性導致方法可靠性,穩定性等相對于儀器分析方法較差。從整體宏觀的角度了解生物學檢測方法的間接性是建立一個穩定的生物學檢測方法的關鍵因素之一。 如下圖所示,儀器分析方法(a......閱讀全文
體外培育牛黃的功能主治
清心,豁痰,開竅,涼肝,熄風,解毒。用于熱病神昏,中風痰迷,驚厥抽搐,癲癇發狂,咽喉腫痛,口舌生瘡,癰腫疔瘡。
體外培育牛黃的功能主治
清心,豁痰,開竅,涼肝,熄風,解毒。用于熱病神昏,中風痰迷,驚厥抽搐,癲癇發狂,咽喉腫痛,口舌生瘡,癰腫疔瘡。
體外診斷儀器的功能模塊
體外診斷儀器作為各類臨床標本進行檢測的醫療設備和醫用電子診斷設備,大型影像設備一樣在現代醫療診療中發揮著重要的作用,今天就體外診斷儀器的基本功能模塊進行介紹。?各類體外診斷儀器因檢測的項目不同,其檢測原理,結構和組成會有差異,但總體來說,基本結構都離不開液路,光路,機械,電子,溫控幾個系統,其基本步
體外受精兒童易患甲狀腺功能障礙
根據美國生殖醫學會(ASRM)2014年會上公布的一項最新研究顯示,通過體外受精(IVF)出生的兒童,尤其是那些通過新鮮胚胎移植出生的兒童,患甲狀腺功能障礙(Thyroid dysfunction)的風險明顯升高。 此次公布的這項橫斷面回顧性研究,是將體外受精結果的重點從成功率和產科結果轉向后
巨噬細胞體外培養后功能檢測的方法
巨噬細胞體外培養后功能檢測的方法1.吞噬中性紅的方法:取制備的24孔或96孔板Mφ單層,然后向每孔加入0.1%的中性紅生理鹽水液,繼續培養20min,傾去上清液,用溫PBS洗3遍,去除未被吞噬的中性紅顆粒,每孔加入細胞溶解液(乙酸∶無水乙醇=50∶50)0.2ml,室溫下放置2~3h,待細胞溶解后,
帕金森體外模型帕金森體外模型
體外培養的中腦多巴胺能神經元MPTP損傷模型l實驗操作:實驗采用胚胎齡14一16天的大鼠,剖子宮取胎,取胎鼠中腦腹側區。可將多個胚胎來源的組織收集在一起,置Fl2培養基(Gibco)至35mm的培養皿中,以細剪刀剪碎。將2ml含0.125%的胰酶的F12加入到組織中,該混合物于37oC孵育10分鐘后
自動體外模擬除顫訓練儀的功能特點介紹
自動體外模擬除顫儀由主機、電池盒、訓練專用電極貼片和遙控器組成; 適用于高等醫學院校、護理學院、職業衛生學校、醫院師生進行BLS訓練、教學使用,使學員熟悉BLS的急救過程和步驟,掌握AED除顫儀的使用方法。 標準配置: 1、AED自動體外模擬除顫儀:1臺 2、遙
體外功能學實驗開發的一般原則
?? 本文從整體角度分析生物學功能評價和檢測分析方法的雙重間接性,并以最基本的生物學功能實驗,配 體受體結合相關實驗為實例,介紹采用ELISA技術競爭法進行配體受體結合相關實驗方法學開發的一般過程,區分以樣品以親和力大小比較和定量檢測為使用目的兩個方面具體應用及方法質量的初步評價,并討論采用同不同檢
體外診斷領域功能微納米材料研究綜述論文
多因子生物檢測,即在復雜生物樣本中同時檢測一系列目標物,對于分析生物反應和過程、疾病診斷等方面都比單因子檢測有著明顯的優勢,并對人類健康問題和生命科學的發展有著重要意義。而針對目前多因子檢測領域還存在的一些關鍵性的問題,例如如何增加可分辨的信號數量用于待測物編碼、如何提高整個體系的檢測性能以滿足
基于人類多功能干細胞的微流體體外培養模型
密西根大學傅劍平教授團隊設計了一種基于人類多功能干細胞的微流體體外培養模型。在該模型中,人類多功能干細胞可以非常近似的模擬人類胚胎著床早期的若干關鍵階段的發育,并且具有高度的可控性及重復性。相關研究結果發表在Nature雜志,論文標題為“Controlled modelling of human
Science:原代人肝臟細胞在體外的長期功能性維持
北京大學生命科學學院鄧宏魁教授課題組、解放軍總醫院盧實春教授課題組和復旦大學袁正宏教授課題組合作,在《科學》(Science)雜志上發表了題為“原代人肝臟細胞在體外的長期功能性維持(Long-term functional maintenance of primary human hepatoc
體外轉錄
·?????????In Vitro RNA Transcription?(Promega)For?in vitro?preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f
siRNA體外轉染——GenMuteTM-siRNA體外轉染的優化
GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。最佳的siRNA濃度范圍是1.0nM到10nM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”。我們實驗室已經使用GenMuteTM轉染試劑成功敲除了內源表達的生長因子。以24孔板為例,如下步
體外重組的定義
中文名稱體外重組英文名稱in vitro recombination定 義在體外對生物的遺傳物質或人工合成的基因進行改造或重新組合形成新的核酸分子或新的基因的手段。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
體外重組(in-vitro-recombination)
載體與外源DNA分子體外重組時,如何選擇優化連接條件以達到最高的重組率。因此有必要根據影響連接效率的因素綜合考慮連接條件。影響連接效率的因素很多,如反應溫度、插入片段和載體之間的摩爾比、DNA末端性質、反應時間、ATP濃度等。1. 反應溫度是比較重要的影響因素。因為連接酶的最適反應溫度為37℃,
體外培養的概念
中文名稱體外培養英文名稱in vitro culture定 義將活體結構成分(如活體組織、活體細胞、活體器官等)甚至活的個體從體內或其寄生體內取出,置于類似于體內生存環境的體外環境中生長和發育的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
體外轉錄合成單鏈RNA探針:體外轉錄法
體外轉錄法l????????體外轉錄合成單鏈RNA探針1.??????用適當的限制酶消化超螺旋質粒DNA制備5 pmol的線性模板DNA。取一小份消化的DNA(100ng)進行瓊脂糖凝膠電泳分析。如有必要,再補加限制性酶進行溫育,直至不再殘存痕量的未消化DNA。2.??????如必須用產生3’突出端
天津工生所體外合成功能性二糖研究獲進展
功能性二糖是一類具有特殊功效的低聚糖,由兩個單糖通過不同糖苷鍵連接而成,具有高甜度、低卡路里、低升糖指數的特點,可作為益生元和功能性甜味劑用于食品領域。此外,某些功能性二糖還因其獨特的功能,被廣泛應用于化妝品、生物技術和制藥等領域。二糖的傳統制備方法是天然聚糖的酸解純化,但是對應的天然聚糖供應有
科學家首次解析腫瘤染色體外DNA的環狀結構與功能
早期研究認為腫瘤中大量擴增的原癌基因存在于染色體上。2017年,來自美國加州大學圣迭戈分校的Paul Mischel教授團隊在Nature雜志上指出,它們是以染色體外DNA(extrachromosomal DNA,ecDNA)的形式存在的,但ecDNA的結構和功能一直缺乏直接的證據。 201
利用體外培養干細胞能夠重建鼻腔的組織結構與嗅覺功能
塔夫茨大學醫學院的一組研究人員開發了一種培養嗅覺干細胞的方法,然后用于恢復鼻腔組織。這一發現使人們希望未來的治療方法可以用來恢復因受傷或退化而受損的個體的嗅覺。這種被稱為水平基底細胞(HBC)的干細胞在移植到受損組織中時可以重新填充所有嗅上皮(OE)細胞類型,包括感覺神經元。 相關結果發表在《
體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
實驗材料 質粒 DNA 模板試劑、試劑盒 無核酸酶污染的水 [35S] 標記的甲硫氧酸 TNT 快速超級混合液 T7TNTPCR 增強液儀器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 離心機 水浴槽 聚丙烯酰胺凝膠電泳裝置實驗步驟 ―、材料與設備1) 無核酸酶污染的水。2)[35S] 標記的甲硫氧
體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
? ? ? ? ? ? 實驗材料 質粒 DNA 模板 試劑、試劑盒 無核酸酶污染的水 [35S] 標記的甲硫氧酸 TN
Cell-Research:體外大規模制備人功能成熟細胞的新方法
2019年7月3日,北京大學醫學部基礎醫學院干細胞中心鄧宏魁、時艷研究組與合作者解放軍總醫院盧實春研究組于Cell Research發表了題為“兩步法策略將成纖維細胞重編程為功能成熟的人肝臟細胞”(A two-step lineage reprogramming strategy to gene
科學家發現功能增強子導致染色體外致癌基因擴增
近日,美國克利夫蘭凱斯綜合癌癥中心等科研機構的科研人員在Cell上發表了題為“Functional Enhancers Shape Extrachromosomal Oncogene Amplifications”的文章,發現功能增強子導致染色體外致癌基因擴增 跨越致癌基因邊界的非編碼區擴增一
體外診斷準備加碼
體外診斷,即 IVD(In Vitro Diagnostic),是指在人體之外,通過對人體樣本(各種體液、細胞、組織樣本等)進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病或機體功能的產品和服務。 體外診斷在醫療領域被譽為“醫生的眼睛”,是現代檢驗醫學的重要構成部分,臨床應用貫穿了疾病預防、初步診斷、
體外DNA重組技術2
【注意事項】基因組DNA分子量大,所有操作必須輕柔,酚/氯仿對皮膚有腐蝕作用,應該戴手套操作。二、RNA的制備【實驗目的】1.理解生物細胞中RNA制備方法的原理。2.熟悉組織細胞中RNA制備的基本操作。(一)細胞總RNA的提取1.異硫氰酸胍法【實驗原理】異硫氰酸胍法提取細胞總RNA是目前常用的提取方
體外DNA重組技術5
(三)DNA酶切片段的回收【實驗方法與步驟】1.凍融法:(1)在UV燈下,用手術刀片將含DNA片段的瓊脂糖凝膠切下,-70℃冷凍至少 15min,然后在65℃水浴中使膠融化;(2)加入等倍體積TE-飽和酚,劇烈振蕩30秒鐘,然后-70℃冷凍 15min;(3)室溫融化后,12,000rpm離心5mi
體外DNA重組技術4
(二)質粒的大量制備:1.將5ml轉化菌種接種于500ml LB培養液(含用于篩選的抗生素)中,37℃以225rpm速度振蕩培養12~16小時;2.10,000rpm,4℃離心15min收集菌體;3.將細菌懸浮于100ml預冷的STE(0.1M NaCl,10mM Tris.Cl,pH8.0,1mM
體外DNA重組技術3
【實驗試劑與器材】(1)Oligo(dT)纖維素(2)層析柱裝置(3)1×上樣緩沖液:20mM Tris.Cl (pH7.6),0.5M NaCl,1 mM EDTA.Na2 (pH8.0),0.1%十二烷基肌氨酸鈉(SLS)配制方法: 用Tris.HCl、NaCl和EDTA母液,加入各成分確切
體外培育牛黃的性狀
本品呈球形或類球形,直徑0.5-3cm。表面光滑,呈黃紅色至棕黃色。體輕,質松脆,斷面有同心層紋。氣香,味苦而后甘,有清涼感,嚼之易碎,不粘牙。