TLC中上樣差別
上樣上樣也有干法和濕法之分:干法(也稱硅膠制沙)就是把待分離的樣品用少量溶劑溶解后,在加入少量硅膠,拌勻后再旋去溶劑。如此得到的粉末再小心加到柱子的頂層。干法上樣較麻煩,但可以保證樣品層很平整。(我一般喜歡用這種方法,除非不能用)濕法上樣就是用少量溶劑(最好就是展開劑,如果展開劑的溶解度不好,則可以用一極性較大的溶劑,但必須少量)將樣品溶解后,再用膠頭滴管轉移得到的溶液,沿著層析柱內壁均勻加入。然后用少量溶劑洗滌后,再加入。濕法較方便,但不溶劑讓其完全被硅膠均勻吸附,不容易跑的很平整。柱層析關鍵在于柱子是否裝好(這是最大影響因素)和淋洗劑是否選擇恰當。而淋洗劑的選擇則是通過TLC確定。這里要指出的一點是:TLC(作用還是很大的)的作用除了跟蹤反應進程,檢測試劑和原料純度外,一個重要的用途就是為柱層析選擇適當的淋洗劑。上樣完畢后,接著即用淋洗劑淋洗。淋洗劑一般采用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一倍后的溶劑。由于層析柱和薄板的不......閱讀全文
TLC中上樣差別
上樣上樣也有干法和濕法之分:干法(也稱硅膠制沙)就是把待分離的樣品用少量溶劑溶解后,在加入少量硅膠,拌勻后再旋去溶劑。如此得到的粉末再小心加到柱子的頂層。干法上樣較麻煩,但可以保證樣品層很平整。(我一般喜歡用這種方法,除非不能用)濕法上樣就是用少量溶劑(最好就是展開劑,如果展開劑的溶解度不好,則可以
色譜中上行法制樣方法
上行法? 色譜缸基本和下行法相似,唯除去溶劑槽和支架,并在色譜缸蓋上的孔中加塞,塞中插入玻璃懸鉤,以便將點樣后的色譜濾紙掛在鉤上。色譜濾紙一般長約25cm,寬度則視需要而定。必要時可將色譜濾紙卷成筒形。點樣基線距底邊約2.5cm,點樣方法與下行法相同。色譜缸內加入適量流動相,放置,俟流動相蒸氣飽和后
TLC柱層析上樣的技巧
上樣的技巧上樣也有濕法和干法之分: 濕法一般用淋洗劑溶解樣品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶劑越少越好。再用膠頭滴管轉移得到的溶液,沿著層析柱內壁緩慢地均勻加入。在不用海沙的情況下, 盡量不要破壞硅膠面。加樣后, 打開柱底活塞, 讓固定相充分地吸附所加樣品。然后再加入一些洗脫劑,再充分地吸
蛋白質電泳中上樣Buf中甘油有啥作用
甘油防止蛋白擴散,甘氨酸起著濃縮蛋白的作用。當樣品液和濃縮膠選TRIS/HCL緩沖液,電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開始后,HCL解離成氯離子,甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質帶負電荷,因此一起向正極移動,其中氯離子最快,甘氨酸根離子最慢,蛋白居中。電泳開始時氯離子泳動率最大,超過蛋白,因此在
GC分流進樣與不分流進樣的差別
分流進樣和不分流進樣在操作參數的設置,對樣品的要求以及襯管結構方面也有很大區別,下面分別討論之.分流進樣(一)載氣流路和襯管選擇分流進樣時載氣流路如圖4-2a所示.進入進樣口的載氣總流量由一個總流量閥控制,而后載氣分成兩部分:一是隔墊吹掃氣(1~3mL/min),二是進入汽化室的載氣.進入汽化室的載
GC分流進樣與不分流進樣的差別
分流進樣和不分流進樣在操作參數的設置,對樣品的要求以及襯管結構方面也有很大區別,下面分別討論之.分流進樣(一)載氣流路和襯管選擇分流進樣時載氣流路如圖4-2a所示.進入進樣口的載氣總流量由一個總流量閥控制,而后載氣分成兩部分:一是隔墊吹掃氣(1~3mL/min),二是進入汽化室的載氣.進入汽化室的載
氣相自動進樣和手動進樣有哪些差別
頂空進樣法是氣相色譜特有的一種進樣方法,適用于揮發性大的組分分析。 傳統的頂空進樣法只是簡單地在一個溫控浴中加熱已放入標準溶液和待測樣品的頂空取樣瓶,并使用一個氣密針將頂空氣體定量的轉移入氣相色譜儀進樣口。此方法為手動進樣,重復性差,進樣針也需要加熱至與樣品瓶同樣溫度或高于樣品瓶溫度以防止物
TLC展開
展開(1)展開劑的配制? ??配制展開劑時,應嚴格控制其比例準確度,如遇到比例很小的溶劑時,應盡量滿足其精確度要求,而不是為圖方便直接用滴管加入。展開劑配好后如果渾濁不清,不能立即使用。應轉移入分液漏斗中,待其靜置分層澄清后再取其上層( 或下層) 液進行展開。(2)展開劑的用量??? 展開劑的用量以
TLC優點
優點及應用薄層色譜可適用小量樣品(幾到幾十微克甚至0.01μg)的分離:也可用于多達500mg樣品的分離,是近代有機化學中用于定性,定量的一種重要手段。特別適用于那些揮發性小的化合物,以及在高溫下易發生化學變化而不能用氣相色譜分析的物質。
制備TLC
制備TLCTLC還可用于少量如100毫克左右的化合物的分離,此時混合物樣品不是“點”在板上,而是涂抹在TLC板上且高于洗脫劑液面上的位置,形成一條水平的樣品帶。然后如同展開小型TLC板一樣將制備TLC板展開并晾干,然后將每條攜帶不同化合物的色帶從板上分別刮下,并用合適的溶劑萃取洗滌(如二氯甲烷)并過
TLC顯色
顯色展開后的薄層,可直接檢視或顯色后檢視。顯色方式有噴霧顯色、浸漬顯色和蒸氣顯色。噴霧顯色是將顯色劑用噴霧的方法均勻撒于薄層板上,操作時要盡可能控制液滴細微,同時使板各部位的噴霧密度盡可能一致。顯色劑的量要適當,太多則烘干時間延長,使斑點顯色時間延長,多余顯色劑流向板下方,容易產生斑點變形;太少則斑
TLC原理
原理色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在某一物質中的吸附或溶解性能的不同,或和其它親和作用性能的差異,使混合物的溶液流經該種物質,進行反復的吸附或分配等作用,從而將各組份分開。薄層色譜是一種微量、快速和簡便的色譜方法。由于各種化合物的極性不同,吸附能力不相同,在展開劑上移動,進行不同程度的解析,根
TLC的原理
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點
TLC實驗流程
實驗流程鋪板→點樣→展開→顯色→計算Rf值
TLC樣品收集
收集主要依靠TLC(據說國外有石英柱,直接用熒光燈照能看出來,不過太貴了,在國內不一定適用),需要切記的是:?第一、某種樣品在這種展開劑中只顯示一個點,并不等于在別的展開劑中也只顯示一個點。因此在尋找展開劑時,多嘗試幾種比例不同,成分不同的展開劑。展開劑的極性太小,點分不開,極性太大,也分不開.一般
薄層色譜(TLC)定義
定義薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜,是近來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法。
TLC邊緣效應
邊緣效應展開劑在薄層上運行時,極性較弱的展開劑和沸點較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發,使薄層板上展開劑的比例不一致,極性發生變化,因此產生了邊緣效應。解決方法? ?增加層板缸中溶劑蒸氣濃度,在層板缸內壁貼上浸濕展開劑的濾紙或選擇內徑和長度適宜的層析缸進行層析;選擇適宜的單一溶劑代替混合溶劑;采用共
TLC是什么色譜
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點
TLC操作方法
操作方法?(1) 薄層板制備 除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(
TLC發展趨勢
發展趨勢現代薄層色譜基本都是由各種儀器來代替,以消除在實驗過程中的諸多影響因素。這也是國內科技發展的大趨勢,逐漸取代人為因素在實驗過程中的影響,從而達到重現性的效果。?在應用方面也是多種多樣,在制藥、食品、保健品、化妝品、法檢、飼料、工業等方面均有較廣泛的應用。
什么是TLC檢測
薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用于跟蹤反應進程。
TLC點樣注意點
點樣注意點?點樣量:原點位置對樣品容積的負荷量有限,體積不宜太大,一般為0.5~10μl,樣品的濃度通常為0.5~2 mg,太濃時展開劑從原點外圍繞行而不是通過整個原點把它帶動向前,使斑點拖尾或重疊,降低分離效率。點樣量太小,不能檢出清晰的斑點影響判斷。點樣量太多,展開劑不能全部負載,容易產生拖尾現
什么是TLC檢測
薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用于跟蹤反應進程。
TLC分析與顯色
分析與顯色由于被分離出的化學品可能是無色的,因此下列幾種方法可用于讓沒有可見光吸收的斑點顯色:通常在可使用少量的熒光化合物,如錳-活化的鋅硅酸鹽加入到吸附相當中,使得吸附物在黑光(UV254)下可以顯色。固定相在熒光下本身顯綠色,因此化合物的斑點可以掩蓋掉熒光下的綠色從而達到顯色目的。碘蒸氣是對于大
什么是TLC檢測
薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用于跟蹤反應進程。
薄層色譜(TLC)定義
薄層色譜(TLC)是一種非常有用的跟蹤反應的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠,它們是極性很大(標準)或者是非極性的(反相)。流動相則是一種極性待選的溶劑。在5.301中以及大多數實驗室實驗中,都將使用標準硅膠板。將溶液中的反應混合物點在薄板上,然后利用毛
TLC的點樣步驟
點樣? ?(1)樣品溶液一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等揮發性有機溶劑,最好用與展開劑極性相似的溶劑溶解試樣,配成0.5%~1%的試液。? ? (2)點樣量:點樣量的多少與薄層的性能、厚薄及顯色劑的靈敏度有關。一般來說,樣品量最小為幾ng,常用量為幾至幾十μg,制備型的分離可以點樣到mg量。總之點樣量
TLC操作規程
TLC操作規程1 薄層板制備1) 一般將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡。2) 倒人涂布器中,在平面玻板上平穩、均勻涂布,厚度0.25~0.5mm。3) 涂好的薄層板在室溫下置水平臺上晾干。4) 活化應于 l10℃烘30分鐘后使用。2 點樣l) 除另有規定外,點樣一般為圓點
TLC拖尾現象
拖尾現象原因:樣品濃度過大,層析板過載解決方法:直接降低樣品濃度或者是上樣量。原因:樣品對硅膠的吸附能力過強解決方法:對不同體系加入不同的調節劑,酸體系加冰醋酸,堿體系加氨水。原因:展開劑的極性與樣品極性不符,不能做到有效展開解決方法:調節展開劑極性。原因:展開劑對樣品的溶解度不夠解決方法:換極性相
TLC檢視與記錄
檢視與記錄薄層圖譜應及時進行檢視和記錄,以避免圖譜因環境因素發生變化。盡可能用攝像設備拍攝,以光學照片或電子圖像的形式保存。紫外光下拍攝圖譜時,應使用濾光片濾除紫外光以免圖譜與肉眼觀察間存在色差,確保記錄的真實完整。