粘粒和質粒文庫的擴增實驗_基本方案
文庫一旦包裝就應該盡快進行擴增，它可以大大增加文庫的拷貝數，但在擴增時由于克隆的生長速率不同，文庫的組成可能會出現某種潛在的改變。這種文庫克隆組成比率的變化可以通過把文庫克隆預吸附到細菌上并使用一種高密度鋪平板和短期培養的方法而盡量減少。實驗材料質粒試劑、試劑盒LB甘油儀器、耗材硝酸纖維素膜培養箱實驗步驟1. 在含抗生素的平板上加一層硝酸纖維素膜，將抗藥性細菌鋪在硝酸纖維素膜上，培養細菌至菌落邊緣正好相接。2. 往長滿菌落的平板中加入LB培養液，10 cm 平板約加2 ml，15 cm平扳約加4 ml。用一支滅菌的細胞刮棒從硝酸纖維素膜上將菌落刮下來，形成菌懸液。3. 將平板中的菌懸液收集到一個50 ml 塑料管中，加無菌的甘油至終濃度15%，充分混勻后分裝到1 ml的小管中，每管500 μl，于-70℃凍存（這樣分裝的小份保存超過一年仍能存活）。 4. 篩選文庫時，取出......閱讀全文
噬斑擴增實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 細胞中大量繁殖，其他的細胞系可用于噬斑純化和擴增。 實驗材料 重懸重組噬斑 貼壁生長良好的
噬斑擴增實驗
實驗方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 細胞中大量繁殖，其他的細胞系可用于噬斑純化和擴增。實驗材料重懸重組噬斑貼壁生長良好的細胞HeLa S3 細胞試劑、試劑盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培養基篩選試劑（麥考酚酸 黃嘌呤／次黃嘌呤）5-溴脫氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇儀器、耗材杯狀超
噬斑擴增實驗
實驗方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 細胞中大量繁殖，其他的細胞系可用于噬斑純化和擴增。實驗材料 重懸重組噬斑貼壁生長良好的細胞HeLa S3 細胞試劑、試劑盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培養基篩選試劑（麥考酚酸 黃嘌呤／次黃嘌呤）5-溴脫氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇儀器、耗材
多重－PCR－擴增實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多重PCR（multiplex PCR），其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定。重PCR的特點有：①高效性在同一PCR反應管內同時
多重－PCR－擴增實驗
試劑、試劑盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 酶和酶緩沖液Taq 聚合酶許多 Taq 聚合酶都可以用；作者發現 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以滿足大多數需要. 如果需要提高PCR 產物的特異性，應該使用熱啟動聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附帶的
PCR基因擴增實驗
[實驗目的]通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction,PCR）的原理類似于DNA的天然復制過程。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物，經變性、退火和延伸若干個循環后，DNA擴增2n倍。1．變性：加
多重－PCR－擴增實驗
多重PCR擴增實驗可以用于：（1）在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物，或對有多個型別的目的基因進行分型，特別是用一滴血就可檢測多種病原體；（2）多重PCR很適宜于成組病原體的檢測，如肝炎病毒，腸道致病性細菌，性病，無芽胞厭氧菌，戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢；（3）多種病原體在同一反應管內
cDNA－擴增和影印實驗
實驗方法原理 實驗材料 保存于細菌中的克隆純的、已測序確證的人 EST 序列試劑、試劑盒 LB 培養基超級肉湯培養基乙醇裂解液RNA 酶溶液緩沖液乙醇 乙酸溶液丁二酸酐1－甲基－2－吡咯烷酮硼酸鈉儀器、耗材 離心機96 孔熱循環儀水浴鍋微量滴定板清洗儀實驗步驟 實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具
cDNA－擴增和影印實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 保存于細菌中的克隆純的、已測序確證的人 EST 序列 試劑、試劑盒
cDNA－擴增和影印實驗
實驗材料保存于細菌中的克隆純的、已測序確證的人 EST 序列試劑、試劑盒LB 培養基超級肉湯培養基乙醇裂解液RNA 酶溶液緩沖液乙醇 乙酸溶液丁二酸酐1－甲基－2－吡咯烷酮硼酸鈉儀器、耗材離心機96 孔熱循環儀水浴鍋微量滴定板清洗儀實驗步驟實驗所需「材料」、「試劑」、「耗材」具體見「其他」1. 將密
臨床基因擴增實驗的概述
臨床基因擴增實驗又稱PCR實驗，是專門用來檢驗艾滋病、 乙型肝炎、禽疫病等病毒 感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內所含的基因進行擴增的方法，測出一些病毒含量不高的 感染者體內是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有 靈敏度高、 特異性高、快捷、對 樣品
PCR基因擴增儀實驗原理
技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體，在以16位單片機為核心的電控裝置管理下，能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測，避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及高通量實
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液（包含所有 4 種 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相當產品）3. 核酸和寡核苷酸DNA 樣品（即方案 2 第 16 步中的各消減樣品
大片段的精確擴增實驗
試劑、試劑盒 甜菜堿PCR 反應緩沖液TEN+BSA酶和酶緩沖液核酸及引物儀器、耗材 PCR 儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑滅菌水配制的下列試劑，儲存在指定的溫度條件下。(1) 5mol/L 甜菜堿（SigmaB-2629 或 SigmaB-2754)過濾滅菌，室溫保存。(2) 10X
噬菌體文庫的擴增實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 噬菌體 試劑、試劑盒
大片段的精確擴增實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甜菜堿 PCR 反應緩沖液 TEN+BSA 酶和酶緩沖液 核酸及引物 儀器、耗材
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液（包含所有 4 種 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相當產品）3. 核酸和寡核苷
大片段的精確擴增實驗
用 10 對不同的引物擴增約 5kb 的片段，模板 DNA 是一樣的，反應體系是 50ul, 對照中未加模板，含有單一引物。對于循環數較多（25?40) 的反應，一般應設置一個沒有模板或單引物對照。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒甜菜堿PCR 反應緩沖液TE
噬菌體文庫的擴增實驗
實驗材料?噬菌體試劑、試劑盒?MgSO4麥芽糖瓊脂糖氯仿DMSOSM儀器、耗材?離心機分光光度計水浴鍋實驗步驟 1.? 制備鋪平板菌（1）2.5 ml 新鮮過夜培養的宿主菌液接種于250 ml 含0.2%麥芽糖和10 mmol/l MgSO4的LB培養液中。（2）在37℃恒溫搖床劇烈搖蕩2~4 h，
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
在本方案所描述的反應中，差異 DNA 被選擇性地擴增。每個實驗至少應該有 4 個反應：①已消減的檢測 DNA;②未消減的檢測者對照（1-c);③反向消減的檢測 DNA;④反向未消減的對照（2-c)。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑
基因擴增實驗室要求
對 PCR 實驗進行嚴格設置的惟一目的就是為了避免污染。原則上臨床基因實驗室應分為四個隔開的工作區域，并且每一區域都應有專用的儀器設備，即①試劑貯存和準備區；②標本制備區；③擴增反應混合物配制和擴增區；④擴增產物分析區。如使用擴增和產物檢測同時完成的熒光定量 PCR 方法，或全自動分析儀法如?Cob
噬菌體文庫的擴增實驗
文庫一旦包裝就應該盡快進行擴增，它可以大大增加文庫的拷貝數，但在擴增時由于克隆的生長速率不同，文庫的組成可能會出現某種潛在的改變。這種文庫克隆組成比率的變化可以通過把文庫克隆預吸附到細菌上并使用一種高密度鋪平板和短期培養的方法而盡量減少。文庫一旦包裝就應該盡快進行擴增，它可以大大增加文庫的拷貝數，但
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增區的污染防治
下述工作在本區內進行:DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。不能
基因的PCR擴增實驗擴增不出DNA條帶是什么原因
可能有很多原因，最常見的原因是1.模板不干凈，2.引物設計不當，3.退火溫度過高，等等
PCR基因擴增及擴增產物的回收實驗原理及過程
實驗目的 為了獲得大量的AKP基因，我們需要將目的基因通過PCR擴增基因劑量，方便下一步實驗作基因重組。 我們需要注意PCR產物的準確性和產率。特別注意引物、復性溫度、TaqE對準確性的影響和延伸時間（1000bp/min）、Mg2+濃度、循環數（小于等于30）對產率的影響。
庫－DNA－的大規模擴增實驗
實驗方法原理 非常長且復雜的庫經常需要若干毫升規模的 PCR 擴增。大規模 PCR 與常規 PCR的不同之處在于它一般在水浴中進行，而且需要使用 15 ml、17 mm×120 mm 的螺紋口蓋子的熱穩定管子（Sarstedt） 來容納更大的體積。高至 2.5 L 體積的擴增反應都曾用這
基因組文庫的擴增實驗
實驗方法原理 通過平板培養可對重組噬菌體文庫進行擴增，平板培養的原種可直接來源于本方案所述的包裝混合物。但只要可能，該擴增過程可被省略，而感興趣的 DNA 序列可從原始文庫直接篩選。擴增將不可避免地降低文庫的復雜性，部分原因在于在連續幾輪的噬菌體生長中，對生長緩慢的重組噬菌體來說是十分不利的
大鼠MSCs的獲得和擴增實驗
實驗方法原理 實驗材料 大鼠骨髓試劑、試劑盒 滅菌CCM含0.2μg ml兩性霉素B(兩性霉素B洗劑）紗布含100U ml青霉素100μg ml鏈霉素和0.2μg ml兩性霉素B的PBSA無鎂和鈣的Hank’s平衡鹽溶液（HBSS)儀器、耗材 塑料Petri培養皿 15 cm直徑裝有#10和#15刀
大鼠MSCs的獲得和擴增實驗
收集大鼠骨髓用于MSCs生產大鼠骨髓原代培養用于MSCs生產實驗方法原理實驗材料大鼠骨髓試劑、試劑盒滅菌CCM含0.2μg ml兩性霉素B(兩性霉素B洗劑） 紗布 含100U ml青霉素 100μg ?ml鏈霉素和0.2μg ?ml兩性霉素B的PBSA 無鎂和鈣的Hank’s平衡鹽溶液（HBSS)儀
基因組文庫的擴增實驗
通過平板培養可對重組噬菌體文庫進行擴增，平板培養的原種可直接來源于本方案所述的包裝混合物。但只要可能，該擴增過程可被省略，而感興趣的 DNA 序列可從原始文庫直接篩選。擴增將不可避免地降低文庫的復雜性，部分原因在于在連續幾輪的噬菌體生長中，對生長緩慢的重組噬菌體來說是十分不利的。本實驗來源「分子克隆