細胞核的預先分離
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSRSB 緩沖液儀器、耗材醫用臺式離心機Dounce 勻漿器實驗步驟1. 在 4℃ 用 PBS 清洗細胞,用一醫用臺式離心機低速離心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 緩沖液懸浮沉淀。每 107 個細胞用 1 ml 緩沖液。用 0.002 英寸間隙的 Dounce 勻漿器破碎細胞。含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 緩沖液:10 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)10 mmol/L NaCl1.5 mmol/L MgCl2每毫升溶液中含的 Tween-DOC 貯存液和 850 μl RSB。用前從 100X 的貯存液中加入 VRC 和 AEBF,至終濃度為 2 mmol/L 和 1 mmol/L。Tween 40 和 DOC 貯存液:6.67% (w/v) Tween 403.33% (w/v) 脫氧膽酸鈉可分成小份凍存于 -20℃2. 4℃,10......閱讀全文
細胞核的預先分離
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSRSB 緩沖液儀器、耗材醫用臺式離心機Dounce 勻漿器實驗步驟1. 在 4℃ 用 PBS 清洗細胞,用一醫用臺式離心機低速離心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 緩沖液懸浮沉淀。每 107?個細胞用 1 ml 緩沖液。用 0.002 英寸間隙的 D
原代細胞核膜的分離
試劑和器材:?1.?DNA酶Ⅰ;2.?KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3.?MgCl2(1mol/L儲存液);4.?苯甲基磺酰氟(PMSF)(無水乙醇配制的1mol/L儲存液);5.?純化的細胞核;6.?緩沖液:2mmol/L Tris-HCl,pH7.4;
原代細胞核膜的分離
1.?DNA酶Ⅰ;2.?KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3.?MgCl2(1mol/L儲存液);4.?苯甲基磺酰氟(PMSF)(無水乙醇配制的1mol/L儲存液);5.?純化的細胞核;6.?緩沖液:2mmol/L Tris-HCl,pH7.4;7.?膜懸浮緩
細胞核的分級分離實驗
實驗材料小白鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒蔗糖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?氯化鈣溶液 ? ? ?
細胞核的分級分離實驗
實驗材料小白鼠試劑、試劑盒蔗糖氯化鈣溶液甲苯胺蘭染液詹納斯綠B染液NaCl溶液儀器、耗材玻璃勻漿器離心機天平光學顯微鏡載玻片蓋玻片離心管滴管量筒燒杯玻璃漏斗解剖剪鑷子實驗步驟1. ?用頸椎脫位的方法處死小白鼠后,迅速剖開腹部取出肝臟,剪成小塊(去除結締組織)盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中,反復
細胞核的分級分離實驗
實驗材料 小白鼠試劑、試劑盒 蔗糖氯化鈣溶液甲苯胺蘭染液詹納斯綠B染液NaCl溶液儀器、耗材 玻璃勻漿器離心機天平光學顯微鏡載玻片蓋玻片離心管滴管量筒燒杯玻璃漏斗解剖剪鑷子實驗步驟 1. ?用頸椎脫位的方法處死小白鼠后,迅速剖開腹部取出肝臟,剪成小塊(去除結締組織)盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯
細胞核的分離提取操作步驟
一、操作步驟1.用頸椎脫位的方法處死小白鼠后,迅速剖開腹部取出肝臟,剪成小塊(去除結締組織)盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中,反復洗滌,盡量除去血污,用濾紙吸去表面的液體。2.將濕重約1g的肝組織放在小平皿中,用量筒量取8ml預冷的0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化鈣溶液,先加少量
原代細胞核膜分離實驗
實驗概要本實驗介紹了原代細胞核膜分離的實驗操作流程。主要試劑1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L儲存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(無水乙醇配制的1mol/L儲存液);5. 純化的細胞核;6. 緩沖液:
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理?? 細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。??? 分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步,這種方法已成為研究
特定細胞類型標記的細胞核分離
從大量的植物或動物組織中分離出特異性的細胞類型是費力和棘手的。為了研究表觀遺傳學上的改變和在不同細胞系中不同表達的基因,如癌細胞與正常細胞,或者擬南芥中兩種類型的表皮細胞(epidermal cell),人們通常必須采用激光捕獲顯微切割(laser capture microdissection,
細胞核與線粒體的分級分離
? 一、原理??? 細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。??? 分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步,這種方法已成
原代細胞核孔復合物的分離
試劑和器材:?1.?肝素;2.?苯甲基磺酰氟(PMSF)(溶于乙醇中配制成1mol/L儲存液);3.?純化的核膜;4.?提取緩沖液(EB):含1%(體積分數)Triton X-100的10mmol/L Tris-HCl,(pH7.4)、0.1mmol/L苯甲基磺酰氟;5.?Tris緩沖液:2mmol
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步,這種方法已成為研究亞細胞成分的化
細胞核與線粒體的分級分離
一、所需試劑及設備小白鼠、冰塊、玻璃勻漿器、普通離心機、臺式高速離心機、普通天平、光學顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刻度離心管、高速離心管、滴管、10ml量筒、25m1燒杯、玻璃漏斗、解剖剪、鑷子、吸水紙、紗布、蠟盤、平皿、牙簽。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
細胞核與線粒體的分級分離
實驗概要掌握細胞核與線粒體的分級分離的實驗技術。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過程包括組織細胞勻漿、分級
細胞核與線粒體的分級分離
實驗概要通過細胞勻漿和離心的方法分級分離細胞的組分,以了解其原理及過程。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同,在同一離心場內的沉降速度也不相同,根據這一原理,常用不同轉速的離心法,將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿,在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離,其過
四膜蟲細胞核的分離實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒辛醇PMSF儀器、耗材攪拌機光學顯微鏡實驗步驟1. 檢測所用細胞數量。2. 收獲細胞前在冷環境中強力攪拌時,在所有溶液中加入蛋白酶抑制劑。3. 在培養基 A 中加入辛醇,混合均勻。在培養基 A 中加入辛醇和 PMSF,即為培養基 B。4. 用吊桶式轉頭在 250 ml 的圓錐
四膜蟲細胞核的分離實驗
實驗材料?細胞試劑、試劑盒?辛醇PMSF儀器、耗材?攪拌機光學顯微鏡實驗步驟 1. 檢測所用細胞數量。2. 收獲細胞前在冷環境中強力攪拌時,在所有溶液中加入蛋白酶抑制劑。3. 在培養基 A 中加入辛醇,混合均勻。在培養基 A 中加入辛醇和 PMSF,即為培養基 B。4. 用吊桶式轉頭在 250 ml
四膜蟲細胞核的分離實驗
四膜蟲細胞核的分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒
四膜蟲細胞核的分離實驗
四膜蟲細胞核的分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒
差速離心分離植物(動物)細胞核
線粒體和細胞核的制備與觀察利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來。(差速離心技術)線粒體是真核細胞特有的進行能量轉換的重要細胞器。將動植物組織制成勻漿,在適當的懸浮介質中差速離心法可以分離細胞線粒體。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉
差速離心分離植物(動物)細胞核
線粒體和細胞核的制備與觀察利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來。(差速離心技術)線粒體是真核細胞特有的進行能量轉換的重要細胞器。將動植物組織制成勻漿,在適當的懸浮介質中差速離心法可以分離細胞線粒體。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉
植物(動物)細胞核差速離心分離
線粒體和細胞核的制備與觀察利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來。(差速離心技術)線粒體是真核細胞特有的進行能量轉換的重要細胞器。將動植物組織制成勻漿,在適當的懸浮介質中差速離心法可以分離細胞線粒體。在一定的離心場中(選用離心機的一定轉
分離核仁實驗——HeLa細胞細胞核或核仁的制備
實驗材料HeLa細胞試劑、試劑盒PBS儀器、耗材Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液:PBSRSB-8 10 mmol/L Tris;10 mmoI/L NaCl,8 mmoI/L 乙酸鎂,pH 7.4RSB 10 mmol/L Tris;10 mmol/L NaCl,1.5 mmol/L
高速冷凍離心機在分離細胞核基質中的應用
?核基質是指真核細胞間核中除核被膜、染色體和核仁以外的一個精密網架系統,既包含蛋白質,又包含RNA。核基質是從純化的細胞核中分離的。要用去污劑、核酸酸處理細胞核。以分離核基質的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介紹1986年Comerford使用過的分離細胞核基質的方法和步驟。1.???大鼠肝臟
高速冷凍離心機在分離細胞核基質中的應用
?核基質是指真核細胞間核中除核被膜、染色體和核仁以外的一個精密網架系統,既包含蛋白質,又包含RNA。核基質是從純化的細胞核中分離的。要用去污劑、核酸酸處理細胞核。以分離核基質的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。?本文介紹1986年Comerford使用過的分離細胞核基質的方法和步驟。?1. 大鼠肝臟
高速冷凍離心機在分離細胞核基質中的應用
核基質是指真核細胞間核中除核被膜、染色體和核仁以外的一個精密網架系統,既包含蛋白質,又包含RNA。核基質是從純化的細胞核中分離的。要用去污劑、核酸酸處理細胞核。以分離核基質的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。?本文介紹1986年Comerford使用過的分離細胞核基質的方法和步驟。?1. 大鼠肝臟(
高速冷凍離心機在分離細胞核基質中的應用
?? 核基質是指真核細胞間核中除核被膜、染色體和核仁以外的一個精密網架系統,既包含蛋白質,又包含RNA。核基質是從純化的細胞核中分離的。要用去污劑、核酸酸處理細胞核。以分離核基質的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介紹1986年Comerford使用過的分離細胞核基質的方法和步驟。1. 大鼠肝臟
從組織中分離制備細胞核基質/中間纖維支架結構
實驗材料新鮮組織試劑、試劑盒NaCl 緩沖液細胞骨架緩沖液儀器、耗材Teflon 研杵Doume 勻漿器實驗步驟1. 在 4℃ 將新鮮組織切成 1 mm3?左右的小塊。在 4℃,用 Teflon 研杵和 Doume 勻漿器在含 0.5% Tritron X-100 的細胞骨架緩沖液中對切碎的組織進行
利用碘克沙醇梯度溶液分離動物細胞核
實驗概要本實驗使用碘克沙醇密度梯度溶液從動物肝臟中分離純化了動物細胞核。主要試劑1. OptiPrepTM(600g碘克沙醇,ρ=1.32g/ml);2. OptiPrepTM稀釋劑(OptiPrepTM diluent,OD):150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmo