特定細胞類型標記的細胞核分離
從大量的植物或動物組織中分離出特異性的細胞類型是費力和棘手的。為了研究表觀遺傳學上的改變和在不同細胞系中不同表達的基因，如癌細胞與正常細胞，或者擬南芥中兩種類型的表皮細胞(epidermal cell)，人們通常必須采用激光捕獲顯微切割(laser capture microdissection, LCM)或者熒光激活細胞分類(fluorescence-activated cell sorting, FACS)方法。LCM使用激光和顯微鏡來直接從組織中輕快地挑出單個細胞到容器里。這就像是在玩挑圓片游戲一樣，但是每次實驗需要挑出上千個單獨細胞，因而這是件非常煩惱的事。與FCAS一樣，LCM也需要昂貴的設備。來自Fred Hutchinson癌癥研究中心的Roger Deal和Steven Henikoff已經開發了一種便宜且又簡單的方法，即特定細胞類型標記的細胞核分離(isolation of nuclei tagged in s......閱讀全文
特定細胞類型標記的細胞核分離
從大量的植物或動物組織中分離出特異性的細胞類型是費力和棘手的。為了研究表觀遺傳學上的改變和在不同細胞系中不同表達的基因，如癌細胞與正常細胞，或者擬南芥中兩種類型的表皮細胞(epidermal cell)，人們通常必須采用激光捕獲顯微切割(laser capture microdissection,
細胞核的預先分離
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSRSB 緩沖液儀器、耗材醫用臺式離心機Dounce 勻漿器實驗步驟1. 在 4℃ 用 PBS 清洗細胞，用一醫用臺式離心機低速離心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 緩沖液懸浮沉淀。每 107?個細胞用 1 ml 緩沖液。用 0.002 英寸間隙的 D
原代細胞核膜的分離
試劑和器材：?1.?DNA酶Ⅰ；2.?KCl（1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4）；3.?MgCl2（1mol/L儲存液）；4.?苯甲基磺酰氟（PMSF）（無水乙醇配制的1mol/L儲存液）；5.?純化的細胞核；6.?緩沖液：2mmol/L Tris-HCl，pH7.4；
原代細胞核膜的分離
1.?DNA酶Ⅰ；2.?KCl（1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4）；3.?MgCl2（1mol/L儲存液）；4.?苯甲基磺酰氟（PMSF）（無水乙醇配制的1mol/L儲存液）；5.?純化的細胞核；6.?緩沖液：2mmol/L Tris-HCl，pH7.4；7.?膜懸浮緩
LSCM組織切片的細胞核標記
組織切片的細胞核標記目前仍然采用?DAPI(4，6-聯脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特點是專一性強、靈敏度高、穩定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激發，獲取明亮的核標記熒光圖像。PI(碘化丙啶?ex 536nm / em 617nm)也可以用于核標記，因
細胞核的分級分離實驗
實驗材料小白鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒蔗糖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?氯化鈣溶液 ? ? ?
細胞核的分級分離實驗
實驗材料 小白鼠試劑、試劑盒 蔗糖氯化鈣溶液甲苯胺蘭染液詹納斯綠B染液NaCl溶液儀器、耗材 玻璃勻漿器離心機天平光學顯微鏡載玻片蓋玻片離心管滴管量筒燒杯玻璃漏斗解剖剪鑷子實驗步驟 1. ?用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊（去除結締組織）盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯
細胞核的分級分離實驗
實驗材料小白鼠試劑、試劑盒蔗糖氯化鈣溶液甲苯胺蘭染液詹納斯綠B染液NaCl溶液儀器、耗材玻璃勻漿器離心機天平光學顯微鏡載玻片蓋玻片離心管滴管量筒燒杯玻璃漏斗解剖剪鑷子實驗步驟1. ?用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊（去除結締組織）盡快置于盛有0.9%NaCl的燒杯中，反復
細胞核的分離提取操作步驟
一、操作步驟1.用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊（去除結締組織）盡快置于盛有0.9％NaCl的燒杯中，反復洗滌，盡量除去血污，用濾紙吸去表面的液體。2.將濕重約1g的肝組織放在小平皿中，用量筒量取8ml預冷的0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液，先加少量
原代細胞核膜分離實驗
實驗概要本實驗介紹了原代細胞核膜分離的實驗操作流程。主要試劑1. DNA酶Ⅰ；2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4)；3. MgCl2(1mol/L儲存液)；4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(無水乙醇配制的1mol/L儲存液)；5. 純化的細胞核；6. 緩沖液：