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  • 利用流式細胞儀檢測CD34+方法異同點

    相關專題實驗室的CT-流式細胞儀應用流式細胞術(FACS)測定動員后的外周血及采集的自體外周血造血干細胞(APBS C)中的CD34+細胞及其亞群,操作簡單、快速、重復性好,對及時掌握最佳采集時機,準確判斷采集的干/祖細胞數量具有重要指導意義。為準確檢測外周血及APBSC中的CD34+細胞,本文比較了幾種FACS檢測CD34+細胞方法的異同。1、材料與方法1.1 外周血造血干細胞 APBSC采集自經環磷酰胺(CTX)+重組 人粒細胞集落刺激因子(rhG-CSF)動員后的實體瘤患者(淋巴瘤、乳腺癌),采集使用CS3000- Plus血細胞分離機(Baxter公司,美國)。1.2 CD34+細胞的標記 對10份APBS C分別進行2種不同再處理與CD34標記。 1.2.1 溶血法 APBSC與CD34-PE熒光單克隆抗體(Immunotec,法國)室溫暗處反應15min,然后用細胞裂解液溶解紅細胞,......閱讀全文

    利用流式細胞儀檢測CD34+方法異同點

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    應用流式細胞儀檢測CD34+細胞方法學評價

    應用流式細胞術(FACS)測定動員后的外周血及采集的自體外周血造血干細胞(APBSC)中的CD34+細胞及其亞群,操作簡單、快速、重復性好,對及時掌握最佳采集時機,準確判斷采集的干/祖細胞數量具有重要指導意義。為準確檢測外周血及APBSC中的CD34+細胞,本文比較了幾種FACS檢測CD34+細胞方

    應用流式細胞儀檢測CD34+細胞方法學評價

    應用流式細胞術(FACS)測定動員后的外周血及采集的自體外周血造血干細胞(APBSC)中的CD34+細胞及其亞群,操作簡單、快速、重復性好,對及時掌握最佳采集時機,準確判斷采集的干/祖細胞數量具有重要指導意義。為準確檢測外周血及APBSC中的CD34+細胞,本文比較了幾種FACS檢測CD34+細胞方

    應用流式細胞儀檢測CD34+細胞方法學評價

     應用流式細胞術(FACS)測定動員后的外周血及采集的自體外周血造血干細胞(APBSC)中的CD34+細胞及其亞群,操作簡單、快速、重復性好,對及時掌握最佳采集時機,準確判斷采集的干 /祖細胞數量具有重要指導意義。為準確檢測外周血及 APBSC中的CD34+細胞,本文比較了幾種 FACS檢測CD

    流式細胞術的展望

    流式細胞儀從細胞技術開始發展到今天,60年代至70年代是其飛速發展時期,激光技術、噴射技術以及計算機的應用使流式細胞儀在原理和結構上形成了固定的模式。80年代則是流式細胞儀的商品化時期,這期間不斷有新型號的儀器推出,在多參數檢測技術上不斷提高。進入90年代,隨著微電子技術特別是計算機技術的發展,計算

    流式細胞儀的發展前景

      流式細胞儀從細胞技術開始發展到今天,60年代至70年代是其飛速發展時期,激光技術、噴射技術以及計算機的應用使流式細胞儀在原理和結構上形成了固定的模式。  80年代則是流式細胞儀的商品化時期,這期間不斷有新型號的儀器推出,在多參數檢測技術上不斷提高。  進入90年代,隨著微電子技術特別是計算機技術

    如何利用流式細胞儀檢測細胞周期

    首先我們這邊先來看下這樣的問題:新消化獲得的細胞直接染色立馬上機檢測,這一步是不是必須的?RnaseA的作用包不包括去處胞內的雙鏈RNA?是的話,RnaseA能直接穿膜嗎?不是的話,胞內的雙鏈RNA不管了?陰參的設定是不是健康成人外周血的淋巴細胞就可以了?? ? ? ?根據這樣的染色方法而定,原理都

    如何利用流式細胞儀檢測細胞周期

    ? ?首先我們這邊先來看下這樣的問題:新消化獲得的細胞直接染色立馬上機檢測,這一步是不是必須的?RnaseA的作用包不包括去處胞內的雙鏈RNA?是的話,RnaseA能直接穿膜嗎?不是的話,胞內的雙鏈RNA不管了?陰參的設定是不是健康成人外周血的淋巴細胞就可以了?? ? ? ?根據這樣的染色方法而定,

    如何利用流式細胞儀檢測細胞周期

    ? ?? 首先我們這邊先來看下這樣的問題:新消化獲得的細胞直接染色立馬上機檢測,這一步是不是必須的?RnaseA的作用包不包括去處胞內的雙鏈RNA?是的話,RnaseA能直接穿膜嗎?不是的話,胞內的雙鏈RNA不管了?陰參的設定是不是健康成人外周血的淋巴細胞就可以了?? ? ? ?根據這樣的染色方法而

    流式細胞技術精彩回顧

    分子生物學主要致力于對細胞中不同系統之間相互作用的理解,包括DNA,RNA和蛋白質生物合成之間的關系以及了解它們之間的相互作用是如何被調控的。而流式細胞儀是測量液相中懸浮細胞或微粒的一種現代分析技術。與傳統的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優點。技術簡介流式細胞術(Flow Cytom

    流式細胞術在血液學中的應用(八)

    細胞分選流式細胞儀能夠分選某一亞群細胞,分選純度>95%。目前細胞分選主要用于研究,臨床應用較少。血液學應用最多的是造血干細胞的研究,最近隨著造血理論的深入研究關于造血干細胞究竟是否都是CD34+細胞出現一些爭論,實驗研究證明,?CD34-造血干細胞較CD34+造血干細胞更具造血潛能,這些實驗研究所

    流式細胞術在血液學中的應用

      DNA倍體分析及細胞周期分析    在細胞周期內,DNA含量隨細胞內時相發生周期性變化,正常情況下,大多數細胞處于休止期(Go), G1期細胞雖有DNA合成,但DNA含量仍為2N,為二倍體細胞,;處于活躍的DNA合成期(S期)的細胞DNA含量為2N-4N;正經歷細胞分裂(G2/M期)的細胞

    流式細胞術的應用

    (一)流式細胞術在細胞生物學中的應用流式細胞術最早被應用于生物學研究領域,就是生物細胞周期和動力學的分析。近年來,DNA倍體分析已經越來越廣泛應用于臨床和基礎研究,發揮越來越重要的作用。1. 有利于腫瘤的早期診斷和鑒別診斷 良性腫瘤或良性增生時不會出現非整倍體細胞(DI>1),而惡性腫瘤則伴有相當數

    流式細胞分選儀檢測CD34+細胞比率

    實驗概要流式細胞分選儀(Flow Activated Cell Sorter,FACS)檢測CD34 細胞比率主要試劑DPBS,流式緩沖液,CD34-FITC抗體,0.5% BSA-DPBS主要設備流式細胞儀,離心機,超凈臺,體視鏡,倒置顯微鏡實驗步驟(1)取1×105個待檢測的細胞,加5 mlDP

    CD34+-細胞的擴增

    實驗概要CD34 ?細胞的擴增主要試劑DPBS、HSCs培養液主要設備超凈臺,倒置顯微鏡,移液槍,細胞計數器實驗步驟(1)分選得到CD34 細胞后用HSC培養液在培養板上進行懸浮培養。(2)每隔2~3天進行半量換液,并進行細胞計數得到生長曲線,培養至19天時細胞增殖約260倍。

    人CD34+細胞分選

    實驗概要人CD34 細胞分選主要試劑HSCs培養液、造血干細胞分選緩沖液、 CD34 磁珠分選試劑盒主要設備磁珠分選系統,離心機,超凈臺,體視鏡,倒置鏡,30μm細胞篩,細胞計數儀實驗步驟(1)用DPBS將30μm細胞篩潤濕,過濾分離得到的單個核細胞,去除細胞團塊。(2)用細胞計數儀進行細胞計數,根

    流式細胞術在血液學中的應用(六)

    白細胞吞噬功能測定粒、單核-巨噬細胞是機體免疫反應和免疫調節細胞中的重要成員。它們不僅具有吞噬功能,吞噬外來的微生物、腫瘤細胞等,同時又分泌多種生物因子參于免疫反應,此外單核-巨噬細胞對抗原物質的攝取、修飾、遞呈等作用,是淋巴細胞的免疫功能必不可少的。因此檢測白細胞吞噬功能對了解機體免疫狀況有重要意

    利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡

    一、基本原理流式細胞儀檢測細胞凋亡:PI單染色法其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變特征性,主要包括以下幾個方面:1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變,造成各種染色體熒光染

    利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡

    一、基本原理流式細胞儀檢測細胞凋亡:PI單染色法其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變zui具特征性,主要包括以下幾個方面:1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變,造成各種染色

    利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡

    一、基本原理流式細胞儀檢測細胞凋亡:PI單染色法其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核?的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變最具特征性,主要包括以下幾個方面:1、細胞核?的改變由于凋亡細胞核?的改變,造成各種染

    流式細胞dna分析的正常值及臨床意義

      正常值  身體處于動態平衡中,沒有疾病。  臨床意義  流式細胞儀的臨床應用:  (1) 流式細胞術在腫瘤學中的應用:流式細胞術可以檢測腫瘤細胞增殖周期、檢測腫瘤細胞表面標記、癌基因表達產物、進行多藥耐藥性分析、檢測凋亡  (2) 流式細胞術在血液學中的應用:檢測白血病和淋巴瘤細胞、活化血小板、

    流式細胞儀常用的幾種檢測方法

    流式細胞儀常用的幾種檢測方法一、測定用乙醇固定的DNA的含量1、培養細胞的DNA含量的測定制備單細胞懸液于200μl的PBS緩沖液中;加入2ml預冷的70%乙醇,4℃保存;?附:細胞固定的一般步驟1)??????? 取單細胞懸液1~2×106個細胞于PBS(PH=7.2)緩沖液中;2)???????

    流式細胞儀常用的幾種檢測方法

    流式細胞儀常用的幾種檢測方法一、測定用乙醇固定的?DNA?的含量1 、培養細胞的 DNA 含量的測定制備單細胞懸液于200μl的PBS緩沖液中;加入2ml預冷的70%乙醇,4℃保存;附 : 細胞固定的一般步驟1) 取單細胞懸液1~2×106 個細胞于PBS(PH=7.2)緩沖液中;2) 300g離心

    流式細胞儀檢測技術操作方法

      一、 細胞和試劑的準備  1. 細胞樣品:來源淋巴細胞或外周血的白細胞。  2. 熒光標記單克隆抗體:常用的有FITC(fluorescein -isothiocyanate)和PE(phycoerythrin)標記的單克隆抗體。  3. 封閉抗體:抗Fc受體抗體  4. FACS緩沖液:  1

    怎樣利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡

    PI 單染并不是很好的看凋亡的方法。一般可以作為早期的篩選實驗,因為特異性不好方法和做細胞周期是一樣的,你可以查一下做細胞周期的實驗方法,我這里就不貼了。幾點注意:一定要設置單細胞gate,以防多聚細胞核雜質的干擾RNA酶不要忘記了固定時間半小時足以,千萬不要在酒精中過夜,不然會產生大量碎片

    怎樣利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡

    這個方法看凋亡,主要是看sub-G1期的細胞數量。原理就是凋亡的細胞,由于DNA正在降解,所以含量比正常細胞要少。在以PI熒光強度(代表DNA量)為橫坐標的柱狀圖上,一般會有2個峰,G1和G2,G1就是正常細胞,G2是正在分裂的2倍體。2者間是S期細胞。如果有凋亡的細胞,在G1前會有細胞出現,就是D

    CD34陽性細胞計數1

    外周血現已被廣泛地被用作骨髓移植、癌癥患者接受大劑量化療或放療后骨髓重建造所需血干細胞(Hemotopoietic Progenitor Cells HPC)的來源。外周血源性干細胞現主要被運用自體移植,其應用面也逐步拓展至異基因骨髓移植中。使用外周血替代骨髓作為造血干細胞的來源有著以下優點:1,易

    流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin-V-法)

    實驗原理Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白,可以與早期凋亡細胞的胞膜結合,而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時早的改變之一。在細胞發生凋亡時,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由質膜內側翻向外側。Annexin V與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,因而與細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸結合。由

    流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin-V-法)

    實驗概要Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑,本實驗介紹了一個用流式細胞儀檢測細胞凋亡的方法(Annexin V 法)。實驗原理Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白,可以與早期凋亡細胞的胞膜結合,而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時最早的改變之一。在細胞發生凋亡

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