蔗糖梯度純化法實驗
實驗材料：染色質粗品試劑、試劑盒：聚碳酸酯離心管儀器、耗材：Dounce 勻漿器實驗步驟：準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品溶液輕輕地加到梯度上，用帶吊桶式轉頭的 JS-13 ( Beckman Instruments ) 或 HB-4 ( Sorvall) 離心機在 2500 g 離心 15 分鐘。3. 3 ml —份輕輕地從梯度頂部取出樣品，取少量用相差顯微鏡檢查染色質的存在情況。4. 收集含染色體的組分在 3000 g 離心 10 分鐘。5. 用大約為起始染色體粗品溶液體積 1/30 的分離緩沖液重懸浮染色體，繼續下一步研究。......閱讀全文
蔗糖梯度純化法實驗
實驗材料：染色質粗品試劑、試劑盒：聚碳酸酯離心管儀器、耗材：Dounce 勻漿器實驗步驟：準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品
染色體分離實驗——蔗糖梯度純化法
實驗材料染色質粗品試劑、試劑盒蔗糖分離緩沖液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 準備兩種 18ml，濃度分別為 20% 和 60% 的蔗糖分離緩沖液（聚胺，水相或己二醇法的緩沖液），然后以線性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯離心管中，用梯度生成器形成沿離心管的密度梯度。2. 將染色質粗品溶液輕輕
線粒體分離實驗—用蔗糖密度梯度法純化線粒體
實驗材料線粒體懸液試劑、試劑盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA儀器、耗材Bockman SW28 號轉頭實驗步驟1. 在用于 Bockman SW28 號轉頭（或與其等同的產品）的 Uitradear 離心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一層 15 ml 1.5 mol
λ噬菌體臂的純化（通過蔗糖密度梯度離心）實驗
實驗方法原理 與插入型載體不同，置換型載體的基因組含有中部的填充片段，為了容納外源 DNA 片段，填充片段必須被去除。該過程一般被稱為“λ 臂的制備”，包括用限制酶消化 λDNA 使兩臂與填充片段分開以及隨后的臂的純化。實驗材料 λ 噬菌體 DNA試劑、試劑盒 EDTA乙醇正丁醇乙酸鈉蔗糖凝膠上樣緩
λ噬菌體臂的純化（通過蔗糖密度梯度離心）實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 與插入型載體不同，置換型載體的基因組含有中部的填充片段，為了容納外源 DNA 片段，填充片段必須被去除。該過程一般被稱為“λ 臂的制備”，包括用限制酶消化 λDNA 使兩臂與填充片段分開以及隨后的臂的純化。
λ噬菌體臂的純化（通過蔗糖密度梯度離心）實驗
與插入型載體不同，置換型載體的基因組含有中部的填充片段，為了容納外源 DNA 片段，填充片段必須被去除。該過程一般被稱為“λ臂的制備”，包括用限制酶消化 λDNA 使兩臂與填充片段分開以及隨后的臂的純化。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理與插入型載體不同，置換型載體的基因組
連續梯度法純化閉環DNA
實驗概要本實驗介紹了氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心法(即連續梯度法)純化閉環DNA的原理及操作步驟等。實驗原理用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于線性 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。許多年來，純化大量質粒 ?DNA 的首選方法是 CsCl
蔗糖梯度為何界面模糊
蔗糖每降低一個濃度梯度,其數量及就降低一個,即低濃度是其相鄰的高濃度的1/10,而當這個濃度梯度小數小到一定程度時,就大約相等了,因而一會后界面就會變得模糊了.
梯度離心時為什么會形成蔗糖梯度？
蔗糖溶液在超速離心的狀態下，會形成一個連續的梯度。雖然它是溶液，但溶質畢竟是有重量的。你在生活中仔細觀察的話，把墨水超速離心，也能看到一個連續的濃淡梯度，原理是差不多的。分子量越大，形成濃度梯度的離心轉速就較小一些。除了蔗糖以外，還有氯化銫的濃度梯度，這些都是為了分離不同分子量的物質所存在的。
Percoll梯度法染色實驗
實驗材料：染色質試劑、試劑盒：精胺、精咪、Percoll、溶液儀器、耗材：聚碳酸酯離心管實驗步驟：1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，勻漿分離得到的染色質。Perco
甘油梯度法染色實驗
實驗材料：染色質試劑、試劑盒：甘油、染色質、分離緩沖液溶液儀器、耗材：JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟：準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度
各級分蔗糖酶活性測定及純化率計算實驗_考馬斯亮藍法
用測定生成還原糖（葡萄糖和果糖）的量來測定蔗糖水解的速度，本實驗中，蔗糖酶的活力單位指在一定條件下反應5 min，每產生1毫克葡萄糖所需酶量。本實驗旨在測定各級分的蛋白質含量及蔗糖酶活性。實驗方法原理用測定生成還原糖( 葡萄糖和果糖) 的量來測定蔗糖水解的速度, 本實驗中, 蔗糖酶的活力單位指在一定
吸附法純化病毒實驗
實驗方法原理 實驗材料 待純化的病毒試劑、試劑盒 凝膠材料儀器、耗材 燒杯實驗步驟 磷酸鈣凝膠：這是病毒凝膠吸附法中較為常用的凝膠，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制備凝膠狀沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸鹽緩沖液懸浮，置千 4℃ 4~5
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。 實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒ED
通過甘油分級梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 本方案適用于制備噬菌體原種、制備噬菌體顆粒（用來獲得 DNA 進行亞克隆）以及制備 λ 噬菌體臂。實驗材料 λ 噬菌體顆粒懸浮液試劑、試劑盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ儀器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 轉子或相當型號離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液E
酵母蔗糖酶的制備實驗——研磨法
蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特異地催化非還原糖中的α-呋喃果糖苷鍵水解, 具有相對專一性。不僅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉
各級分蔗糖酶活性測定－及純化率的計算實驗
考馬斯亮藍法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用測定生成還原糖( 葡萄糖和果糖) 的量來測定蔗糖水解的速度, 本實驗中, 蔗糖酶的活力單位指在一定條件下反應5 min，產生1
各級分蔗糖酶活性測定－及純化率的計算實驗
實驗方法原理用測定生成還原糖( 葡萄糖和果糖) 的量來測定蔗糖水解的速度, 本實驗中, 蔗糖酶的活力單位指在一定條件下反應5 min，產生1 毫克葡萄糖所需酶量。?用考馬斯亮藍法測定蛋白質含量, 比活力為每毫克蛋白質的活力單位數。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒乙酸緩沖液葡萄糖蔗糖二硝基水楊酸儀器、耗材分
吸附法純化病毒實驗_?凝膠吸附法
實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒凝膠材料儀器、耗材燒杯實驗步驟磷酸鈣凝膠：這是病毒凝膠吸附法中較為常用的凝膠，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4?溶液混合制備凝膠狀沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸鹽緩沖液懸浮，置千 4℃ 4~5小時使之充分沉淀后應用
染色體分離實驗——Percoll梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒精胺精咪Percoll 溶液儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 在體積為 10 ml 分離得到的染色質物質中加入精胺和精咪至終濃度分別為 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，勻漿分離得到的染色質。Percoll 溶液：
染色體分離實驗——甘油梯度法
實驗材料染色質試劑、試劑盒甘油 染色質分離緩沖液溶液儀器、耗材JS-13 轉桶式轉頭實驗步驟1. 準備 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色質分離緩沖液溶液。2. 用 JS-13 轉桶式轉頭在 4℃，1000 r/min 離心 50 分鐘進行染色質梯度沉降
DNA純化實驗——PCR清潔試劑盒純化法
實驗方法原理硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。?實驗材料PCR產物試劑、試劑盒PCR清潔試劑盒儀器、耗材96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗步驟一
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗
實驗方法原理 用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法，取決于與線狀 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。實驗材料 粗制質粒試劑、試劑盒 CsCl CsCl 再分帶溶液乙醇溴化乙錠 石蠟油儀器、耗材 皮下注射針頭折光儀一次性注射器實驗步驟 一、材料1.
超速離心法純化病毒實驗——密度梯度離心
實驗方法原理病毒的密度與細胞碎片不同，用梯度制備儀制成適宜的介質梯度如蔗糖梯度或?CsCl?密度梯度，將病毒懸液加到密度梯度的上層，進行超速離心，離心管內病毒懸液中的病毒和細胞碎片隨其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯層中，吸出含有病毒的沉淀帶，即可得到相當純凈的病毒。實驗材料待純化的病毒試劑、
吸附法純化病毒實驗——紅細胞吸附法
實驗方法原理用于某些可與紅細胞吸附的病毒的濃縮，如正粘病毒和副粘病毒，由于紅細胞吸附法是特異的，故可達到濃縮并純化的目的。實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液雞紅細胞懸液儀器、耗材燒杯水浴鍋實驗步驟用作吸附病毒的紅細胞一般選擇適宜動物的紅細胞，常用的是雞紅細胞。基本步驟為：① 1%~3% 雞
DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于：（1）獲得高純度的DNA；（2）濃縮DNA；（3）測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保護劑能防止線狀 D
通過CsCl－等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 CsCl 等密度梯度離心用于制備最高純度的感染性 λ 噬菌體顆粒，它沒有任何細菌核酸的污染。從這種噬菌體顆粒中提取的 DNA 可用作 DNA 測序的模板、亞克隆至質粒載體和產生用于原位雜交的探針。這種方法第二個優點是，由它所獲得的噬菌體原種是高度濃縮的（大于 1011 cf
超速離心法純化病毒實驗——等密度梯度離心
實驗方法原理離心過程中?CsCl?隨離心力而下沉，形成連續梯度，上部密度小而下部密度大，離心管內病毒懸液中的病毒和細胞碎片隨其密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯層中實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒CsCl儀器、耗材離心機實驗步驟在每毫升病毒懸液中，加入?CsCl?約?1 g,?混勻，4℃以?40 0
通過CsCl－等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒實驗
CsCl 等密度梯度離心用于制備最高純度的感染性 λ 噬菌體顆粒，它沒有任何細菌核酸的污染。從這種噬菌體顆粒中提取的 DNA 可用作 DNA 測序的模板、亞克隆至質粒載體和產生用于原位雜交的探針。這種方法第二個優點是，由它所獲得的噬菌體原種是高度濃縮的（大于 1011?cfu/ml)，在 4℃ 保存