小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性實驗
實驗試劑1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培養液與RPMI-1640完全培養液3. ConA或PHA4. IL-1標準品：倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗設備1. 3H-TdR、β-液閃汁數儀，微量細胞收集儀2. 解剖刀、剪、單皿、研磨工具(玻璃勻漿器，不誘鋼網或者毛玻璃片，用于研磨小鼠胸腺)3. 96孔細胞培養板4. 刻度吸管，毛細吸管，刻度離心管、離心機、細胞計數板，倒置顯微鏡，加樣器(頭)，50%CO2培養箱，超凈工作臺實驗材料1. 小鼠：BALB/C或C57BL/6小鼠，6-10周齡，雌雄均可。2. IL-1待測樣品：倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗步驟1. 準備工作與ConA或PHA亞適劑量的確定測定樣品前必須作ConA或PHA的劑量曲線，觀察其對小鼠胸腺細胞增殖的影響，選擇一個既能夠激活胸腺細胞，但又不引起其明顯增殖的合適劑量，即亞適劑量。1) 在96孔培養板各孔中加入小鼠胸腺細胞，100......閱讀全文
小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性實驗
實驗試劑1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培養液與RPMI-1640完全培養液3. ConA或PHA4. IL-1標準品：倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗設備1. 3H-TdR、β-液閃汁數儀，微量細胞收集儀2. 解剖刀、剪、單皿、研磨工具(玻璃勻漿器，不誘鋼網或者毛玻璃片
小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性
實驗試劑1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培養液與RPMI-1640完全培養液3. ConA或PHA4. IL-1標準品：倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗設備1.?3H-TdR、β-液閃汁數儀，微量細胞收集儀2. 解剖刀、剪、單皿、研磨工具(玻璃勻漿器，不誘鋼網或者毛玻璃片
小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性
實驗概要IL-1可協同有絲分裂原(如ConA或PHA)刺激的T細胞或胸腺細胞發生增殖反應，通過3H-TdR DNA摻入法，即可測定IL-1生物活性。此法是目前測定IL-1活性常用而簡便的方法，其敏感度達10-50pg/ml。但本法缺乏特異性，因為IL-1亦可刺激T細胞或胸腺細胞產生一些細胞因
IL1生物學活性檢測實驗——小鼠胸腺細胞增殖法
白細胞介素-1（IL-1）主要是由活化的單核-巨噬細胞合成和分泌的一種細胞因子，具有活化淋巴細胞、協同刺激胸腺細胞增殖、參與抗體產生和促炎癥反應等多種生物學功能。IL-1有IL-1α和IL-1β構成，結合同種受體，表現相同的生物學活性。實驗方法原理IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時，IL-1可刺激小鼠
IL1生物學活性檢測
實驗方法原理 IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時，IL-1可刺激小鼠胸腺細胞增殖。進一步通過3H-TdR摻入法或染料攝入法判定小鼠胸腺細胞增殖量，推定IL-1的生物學活性。通過檢測IL-1的生物學活性，可了解單核-巨噬細胞等的功能。實驗材料 小鼠胸腺細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液L
3HTdR摻入法檢測IL2的生物活性
實驗概要本實驗應用3H-TdR摻入法檢測了IL-2的生物活性。主要試劑1. 10% Fcs-RPMI-1640完全培養液2. 3H-TdR3. IL-2標準品：倍比稀釋為不同濃度主要設備96孔培養板，刻度吸管，毛細吸管，刻度離心管，離心機，加樣器(頭)，細胞計數板，倒置顯微鏡，超凈工作臺，CO2培養
細胞因子生物學活性檢測實驗－古朵實驗√
白細胞介素1是一種重要的細胞因子，主要由單核-巨噬細胞產生，IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能，而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性?小鼠胸腺細胞在絲裂原刺激下表達IL
白細胞介素1生物學活性檢測
實驗方法原理白細胞介素1是一種重要的細胞因子，主要由單核-巨噬細胞產生，IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能，而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性?小鼠胸腺細胞在絲裂原刺
細胞因子生物學活性檢測
實驗方法原理 白細胞介素1是一種重要的細胞因子，主要由單核-巨噬細胞產生，IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能，而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性?小鼠胸腺細胞在絲裂原
細胞增殖檢測：H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)滲入法材料
一、材料及試劑?1、培養基：RPMI-1640或TC199培養液?2、PHA；同形態學方法?3、小牛血清?4、3H-TdR；選用比活性為2Mci~10Mci/mg分子的制品，將1Mci/ml溶液以生理鹽水稀釋成100uci/ml，于4℃保存備用。臨用時再用培養液稀釋成10uci/ml溶液。?5、3%
L929細胞增殖MTT比色法檢測IL1的生物活性
實驗概要IL-1具有刺激多種來源的成纖維細胞增殖的作用，可用于IL-1生物活性檢測。目前國內外大多數實驗室常用L929細胞株(小鼠成纖維細胞瘤細胞)作為檢測IL-1生物活性的靶細胞或反應細胞。本實驗利用L929細胞增殖MTT比色法IL-1的生物活性進行了檢測。實驗原理MTT比色法的原理是利用四甲基偶
細胞因子的檢測
隨著免疫學理論研究的深入，發現的細胞因子日益增多，并在免疫應答的調節和效應中起著重要作用，其在體內水平的高低直接反映機體的免疫狀況。細胞因子檢測的方法主要分三類：①細胞生物學活性檢測法。②免疫學標記技術，常用ELISA。③分子生物學方法，常用逆轉錄PCR檢測細胞因子的mRNA轉錄的情況。現以生物活性
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法
混合淋巴細胞培養(3HTdR摻入法)
實驗概要熟悉混合淋巴細胞培養(mixed lymphocyte cultue，MLC)的原理；掌握分離淋巴細胞的方法；學習用同位素標記進行混合淋巴細胞培養的操作方法。實驗原理混合淋巴細胞培養或稱混合淋巴細胞反應（MLR）是將二個無關個體的淋巴細胞混合在一起培養，由于二者的淋巴細胞膜上的組織相容性抗原
L929細胞增殖MTT比色法檢測IL1的生物活性實驗原理和操...
L929細胞增殖MTT比色法檢測IL-1的生物活性實驗原理和操作步驟【基本原理】IL-1具有刺激多種來源的成纖維細胞增殖的作用，可用于IL-1生物活性檢測。目前國內外大多數實驗室常用L929細胞株（小鼠成纖維細胞瘤細胞）作為檢測IL-1生物活性的靶細胞或反應細胞。MTT比色法的原理是利用四甲基偶氮唑
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原
細胞增殖檢測：3HTdR滲入法原理和操作步驟
一、原理 T細胞、B細胞表面具有識別抗原的受體和有絲分裂原受體，在特異性抗原刺激下可使相應淋巴細胞克隆發生增殖。植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA），抗CD2、抗CD3McAb作為多克隆刺激劑可選擇性地刺激T細胞增殖；而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌體（SAC）、脂多糖（LPS，對小鼠有
細胞活性檢測DNA合成增殖實驗
BrdU檢測法BrdU為胸腺嘧啶核苷（Thymine）的衍生物，可用于標記活細胞中新合成的DNA（細胞活性周期S期），BrdU可隨著DNA復制進入子細胞，因此在加入BrdU后分裂增殖的細胞DNA都會帶有BrdU標記，可通過抗BrdU單克隆抗體檢測，借此檢測細胞的增殖能力，但BrdU單克隆抗體檢測過程
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理
??T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺
T淋巴細胞轉化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一
T淋巴細胞轉化實驗
實驗方法原理T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一。?淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法和同位素法三種。
T淋巴細胞轉化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一
T淋巴細胞轉化試驗的注意事項
檢測方法可分為3H-TdR摻入法、形態學法和MTT法等。 1、3H-TdR摻入法 T淋巴細胞受PHA或特異性抗原刺激后，發生有絲分裂，細胞進入S期，且伴隨新的DNA合成，若此時加入氚標記的胸腺嘧啶核苷3H-TdR，則3H-TdR可被淋巴細胞作為合成DNA的原料攝入，根據3H-TdR的攝入量，可
細胞生長的檢查方法（一）
1.直接計數法是zui簡單的檢測細胞生長的方法。計數細胞一般利用臺盼藍(錐蟲藍染色，臺盼藍(錐蟲藍)不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。而死亡細胞的細胞膜通透性增高，可使染料進入細胞內而使細胞著色。因此，鏡下未染色細胞認為是活細胞，而染色細胞認為是死亡細胞。經典的細胞計數常用到血細胞計數
T－淋巴細胞轉化試驗
實驗概要本文介紹了T 淋巴細胞轉化試驗（T Lymphocyte Transformation Test）的基本原理和操作步驟。實驗原理T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低
T－淋巴細胞轉化試驗
一、 基本原理T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一。淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法和同位素法三種。
以3HTdR－摻入測定DNA合成實驗
實驗方法原理 用3H -TdR 標記細胞，提取DNA用閃爍儀測定放射活性水平實驗步驟 材料無菌處于合適時期的細胞（若使用熱的 2mol/L PCA 方法需要細胞生長于玻璃器皿或試管中，若用其他方法，細胞可培養于常規的塑料皿中）3H-TdR ，0.4 MBq /ml (約 10uC i/ml)，每毫升
以3HTdR－摻入測定DNA合成實驗
實驗方法原理用3H -TdR 標記細胞，提取DNA用閃爍儀測定放射活性水平實驗步驟 材料 無菌 處于合適時期的細胞（若使用熱的 2mol/L PCA 方法需要細胞生長于玻璃器皿或試管中，若用其他方法，細胞可培養于常規的塑料皿中） 3H-TdR ，0.4 MBq /ml (約 10uC i/ml)
以3HTdR－摻入測定DNA合成實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用3H -TdR 標記細胞，提取DNA用閃爍儀測定放射活性水平 實驗步驟 材料 無菌 處于合適時期的細胞（若使用熱的 2mol/L PCA
以3HTdR－摻入測定DNA合成實驗
實驗方法原理用3H -TdR 標記細胞，提取DNA用閃爍儀測定放射活性水平實驗步驟材料無菌處于合適時期的細胞（若使用熱的 2mol/L PCA 方法需要細胞生長于玻璃器皿或試管中，若用其他方法，細胞可培養于常規的塑料皿中）3H-TdR ，0.4 MBq /ml (約 10uC i/ml)，每毫升培養