植物組織中DNA的提取與測定
一、原理 脫氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid，DNA）是一切生物細胞的重要組成成分，主要存在于細胞核中，鹽溶法是提取DNA的常規技術之一。從細胞中分離得到的DNA是與蛋白質結合的DNA，其中還含有大量RNA，即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開是技術的關鍵。DNA不溶于0.14mol/L 的NaCl溶液中，而RNA則能溶于0.14mol/L 的NaCl溶液之中，利用這一性質就可以將二者從破碎細胞漿液中分開。制備過程中，細胞破碎的同時就有Dnase釋放到提取液中，使DNA因被降解而影響得率，在提取緩沖液中加入適量的檸檬酸鹽和EDTA，既可抑制酶的活性又可使蛋白質變性而與核酸分離，再加入陰離子去垢劑0.15％的SDS，經過2h攪拌，或用氯仿－異醇除去蛋白，通過離心使蛋白質沉淀而除去，得到的是含有核酸的上清液。然后用95％的預冷乙醇即可把DNA從除去蛋白質的提取液中沉淀出來。 二、材料、......閱讀全文
植物組織中DNA的提取與測定
一、原理 脫氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid，DNA）是一切生物細胞的重要組成成分，主要存在于細胞核中，鹽溶法是提取DNA的常規技術之一。從細胞中分離得到的DNA是與蛋白質結合的DNA，其中還含有大量RNA，即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開是技術的關鍵。D
植物DNA提取中怎樣檢測提取到DNA質量
第一種方法是測量260/280的比例，判斷是否有蛋白質的污染。在260nm和280nm處測定DNA溶液的光吸收，A260與A280之比應在1.75-1.80之間。低于此值表明制備物中殘留蛋白質成分較高或含有酚，高于此值表明有RNA的殘留。第二種方法是凝膠電泳分析，看有無斷裂降解。影響DNA提取質量的
病毒－DNA－的提取實驗——新鮮或冷凍組織中病毒－DNA－的提取
實驗材料新鮮或冷凍組織試劑、試劑盒勻漿緩沖液裂解液儀器、耗材剪刀勻漿器離心機實驗步驟1. 取新鮮或剛解凍的組織去除血水和結締組織，在冰浴上剪成小碎塊。2. 將組織碎塊移入預冷的勻漿器中，按 10 ml/g 加入勻漿緩沖液，混勻，制成勻漿液。3. 將勻漿液移人 Ep 管， 5000 r/min 離心1
植物組織RNA提取的要點與技巧
從植物組織中提取RNA 是進行植物分子生物學方面研究的必要前提。要進行Northern雜交分析，純化mRNA 以用于體外翻譯或建立cDNA文庫，RT-PCR及差示分析等分子生物學研究，都需要高質量的RNA 。因此，從植物組織中提取純度高、完整性好的RNA 是順利進行上述研究的關鍵所在。從文獻報道上看
不同植物組織中多糖的提取中AIR的制備
實驗概要本人總結的多糖提取前AIR制備過程實驗步驟AIR （alcohol insoluble residue）提取1）新鮮收取的植物在蒸餾水中清洗以除去培養基等物質，后凍干。2）將凍干的樣品在液氮中研磨成粉末。3）AIR （alcohol insoluble residue）制備浮萍、擬南芥葉及根
植物組織中淀粉含量的測定
【原理】 淀粉是由葡萄糖殘基組成的多糖，在酸性條件下加熱使其水解成葡萄糖，然后在濃硫酸的作用下，使單糖脫水生成糠醛類化合物，利用苯酚或蒽酮試劑與糠醛化合物的顯色反應，即可進行比色測定。 【 儀器 與用具】 電子天平；容量瓶：100ml×4，50ml×2；漏斗；小
植物DNA提取實驗
機械法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這是一種快速簡便提取植物總DNA的方法。先將新鮮的葉片在液氮中研磨，以機械力破碎細胞壁，然后加入十六烷三甲基溴化銨分離緩沖液，使細胞膜破
植物DNA提取實驗
實驗方法原理?真核細胞基因組在提取過程中一般有以下幾步，首先是機械法破細胞抽提；然后去除蛋白質，糖類等細胞內雜質污染；最后純化出DNA。實驗材料?幼嫩的植物材料試劑、試劑盒?液氮CTAB抽提緩沖液NaACTris-HCl EDTA氯仿異戊醇TE buffer儀器、耗材?瓷研缽離心管離心機實驗步驟 一
植物DNA提取原理
通常采用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由于植物細胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對DNA的抽提產生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并減少研磨過程中各種酶類的作用。十二烷基肌酸鈉(sarkosyl)、十六烷基三
植物組織類樣本DNA提取完整解操作方法
植物DNA的提取和純化是植物基因工程研究的基礎操作。實施分子標記、基因圖譜、基因指紋圖譜、基因文庫構建、遺傳多態性分析、DNA重組、RAPD（隨機引物多態性DNA）、RFLP（限制性酶多態性）、基因分離及遺傳轉化和鑒定等都以提取DNA為前提。目前，對從植物組織中提取DNA方法的要求是：簡便、有效、快
動物組織塊DNA的提取
實驗目的 1. 學習并掌握動物組織總DNA的提取方法及其原理。 2. 從肝臟組織中提取到一定量的純凈的DNA樣品。 實驗原理 DNA是一切生物細胞的重要組成成分，主要存在于細胞核中。通過研磨和SDS作用破碎細胞；苯酚和氯仿可使蛋白質變性，用其混合液（酚：氯仿：異戊醇）重復抽提，使蛋白質變性，然后離
石蠟包埋組織的DNA提取
近10年來，現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域，為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為，人類基因組并非人們想像的那樣穩定，諸如基因重排、擴增、缺失，突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生，這些改變對于基因表過和調控，以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
動物組織塊DNA的提取
【實驗目的】（1）學習并掌握動物組織總DNA的提取方法及其原理。（2）從肝臟組織中提取到一定量的純凈的DNA樣品。【實驗原理】DNA是一切生物細胞的重要組成成分，主要存在于細胞核中。通過研磨和SDS作用破碎細胞；苯酚和氯仿可使蛋白質變性，用其混合液（酚：氯仿：異戊醇）重復抽提，使蛋白質變性，然后離心
提取動物組織DNA的方法
【實驗步驟】1．組織塊解凍，用生理鹽水洗去血污，剪取約0.5g組織，剪小放入2.0ml離心管中，用FM-200P研磨45秒；2．加入0.45ml TES混勻，再加入50ul SDS（10%），5.0ul蛋白酶K（20mg/ml），充分混勻后，于56°C保溫4-6h，每2h搖1次。3．放置到室溫，加入
動物組織塊DNA的提取
實驗概要學習并掌握動物組織總DNA的提取方法及其原理。從肝臟組織中提取到一定量的純凈的DNA樣品。實驗原理DNA是一切生物細胞的重要組成成分，主要存在于細胞核中。通過研磨和SDS作用破碎細胞；苯酚和氯仿可使蛋白質變性，用其混合液（酚：氯仿：異戊醇）重復抽提，使蛋白質變性，然后離心除去變性蛋白質；RN
動物組織塊DNA的提取
實驗原理DNA是一切生物細胞的重要組成成分，主要存在于細胞核中。通過研磨和SDS作用破碎細胞；苯酚和氯仿可使蛋白質變性，用其混合液（酚：氯仿：異戊醇）重復抽提，使蛋白質變性，然后離心除去變性蛋白質；RNase降解RNA，從而得到純凈的DNA分子。實驗試劑1．生理鹽水2．十二烷基硫酸鈉（SDS）3．三
小鼠肝組織DNA的提取
實驗概要掌握從動物組織中提取DNA的基本原理和方法，了解利用電泳技術分離、鑒定核酸的原理和方法。實驗原理真核生物DNA主要以核蛋白形式存在于細胞核中，因此制備DNA必須先粉碎組織，裂解細胞膜和核膜，使核蛋白釋放，在除去蛋白質、脂類、糖類和 ? RNA等物質，得到純化的DNA。在本實驗的提取DNA反應
植物組織mRNA的提取方法
實驗概要本實驗介紹了植物組織mRNA的提取方法。實驗原理由于mRNA末端含有多poly（A） ,當總RNA流徑oligo（dT）纖維素時，在高鹽緩沖液作用下，mRNA被特異的吸附在oligo（dT）纖維素柱上，在低鹽濃度或蒸餾水中，mRNA可被洗下，經過兩次oligo（dT）纖維素柱，可得到較純的m
植物組織總RNA的提取
實驗概要由于RNA分子的結構特點，容易受RNA酶的攻擊反應而降解，加上RNA酶極為穩定且廣泛存在，因而在提取過程中要嚴格防止RNA酶的污染，并設法抑制其活性，這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA酶，人的皮膚、手指、試劑、容器等均可能被污染，因此全部實驗過程中均需戴手套操作并經常更換（使用一
植物組織中自由水與束縛水含量的測定
自由水和束縛水含量常與植物 ?生長與抗性有密切關系。自由水與束縛水比值較高的植物組織或器官，代謝活動較旺盛，生長也較快；反之則生長較緩慢，但抗性較強。因此，自由水和束縛水的相對含量可以作為代謝活動及抗逆性強弱的重要生理指標。 【原理】 束縛水被細胞膠體顆粒所吸附，水勢較低，故不易移動
植物組織中自由水與束縛水含量的測定
自由水和束縛水含量常與植物生長與抗性有密切關系。自由水與束縛水比值較高的植物組織或器官，代謝活動較旺盛，生長也較快；反之則生長較緩慢，但抗性較強。因此，自由水和束縛水的相對含量可以作為代謝活動及抗逆性強弱的重要生理指標。?一、 原理? ???束縛水被細胞膠體顆粒所吸附，水勢較低，故不易移動、蒸發和結
植物DNA的提取與定量分析實驗
實驗方法原理幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段，細胞核較大而細胞質較少，核酸濃度高，且內含物少，次生代謝產物少，蛋白質及多糖類物質相對較少，在SDS或CTAB物質存在時，經機械研磨，使細胞破裂釋放出內含物，提取的DNA、RNA的產量高，純度好。提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活D
植物DNA的提取與定量分析實驗
實驗方法原理?幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段，細胞核較大而細胞質較少，核酸濃度高，且內含物少，次生代謝產物少，蛋白質及多糖類物質相對較少，在SDS或CTAB物質存在時，經機械研磨，使細胞破裂釋放出內含物，提取的DNA、RNA的產量高，純度好。提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活
植物DNA的提取與定量分析實驗
實驗方法原理幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段，細胞核較大而細胞質較少，核酸濃度高，且內含物少，次生代謝產物少，蛋白質及多糖類物質相對較少，在SDS或CTAB物質存在時，經機械研磨，使細胞破裂釋放出內含物，提取的DNA、RNA的產量高，純度好。提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活D
植物組織中蔗糖酶活力的測定
一、目的 了解植物 ?組織中提取蔗糖酶的方法，掌握蔗糖酶活力測定的原理。二、原理 本實驗以Nelson 方法測定酶活力，其原理是：蔗糖酶可將非還原性的蔗糖水解為葡萄糖和果糖，而葡萄糖作為還原糖含有的自由醛基，在堿性溶液中將Cu 2+ 還原，還原糖本身被氧化成羥酸；砷鉬酸試劑與氧化亞銅生成藍色復合物（
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。在
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理?分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。
石蠟包埋組織DNA提取方法
近10年來，現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域，為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為，人類基因組并非人們想像的那樣穩定，諸如基因重排、擴增、缺失，突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生，這些改變對于基因表過和調控，以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義
石蠟包埋組織的DNA提取方法
近10年來，現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域，為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為，人類基因組并非人們想像的那樣穩定，諸如基因重排、擴增、缺失，突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生，這些改變對于基因表過和調控，以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
特殊組織DNA的提取及鑒定
1、提取DNA的簡易方法:1)、從全血中提取DNA：取20μl抗凝血于0.5ml無菌管中，加500μl左右的ddH2O混勻后，12000rpm離心2分鐘，棄上清，（若沉淀中仍 有紅細胞,需重復此操作1-2次）加入樣品提取液20μl,混勻,100℃煮10分鐘(可在擴增儀上進行)后12000rpm離心5