雙向電泳的常見問題解析
重泡脹后的膠可以不用轉移到另一個電泳槽，直接跑 2D 的一向嗎？一般情況下是可以的。但當上樣量特別大時，可能會有一部分蛋白質沒有被膠條吸收，這樣跑完 1D 和 2D 膠后，會有很多橫向條紋。所以在這種情況下，最好在重泡脹后，將膠條轉移到另外一個電泳漕中進行電泳。為什么我在等電聚焦前加的礦物油在聚焦后會減少，暴露出了膠條的背面？通常情況下，等點聚焦中體系內除了蛋白質還會存在少量帶電小分子，當這些帶電小分子在電場中向兩極運動時，會帶動膠條中的水分子運動，水分子運動會帶動附近的覆蓋油移動，當樣品質量不高，帶電小分子較多時，會導致覆蓋油移動嚴重溢出膠條槽，此時，通常會伴隨膠條的酸性端膠條厚度增加。當發生覆蓋油溢出或膠條暴露時，應及時補加覆蓋油。為了防止這個現象的發生，應從樣品制備時嚴格控制樣品質量，盡量減少帶電小分子如鹽離子的含量。同時可以在相鄰的空電泳槽里，也加入適量（80 %滿）的覆蓋油。跑第一向時，為什么要設定一個電流的最大值電壓......閱讀全文
雙向電泳的常見問題解析
重泡脹后的膠可以不用轉移到另一個電泳槽，直接跑 2D 的一向嗎？一般情況下是可以的。但當上樣量特別大時，可能會有一部分蛋白質沒有被膠條吸收，這樣跑完 1D 和 2D 膠后，會有很多橫向條紋。所以在這種情況下，最好在重泡脹后，將膠條轉移到另外一個電泳漕中進行電泳。為什么我在等電聚焦前加的礦物油在聚焦后
雙向電泳儀的常見問題
重泡脹后的膠可以不用轉移到另一個電泳槽，直接跑 2D 的一向嗎？一般情況下是可以的。但當上樣量特別大時，可能會有一部分蛋白質沒有被膠條吸收，這樣跑完 1D 和 2D 膠后，會有很多橫向條紋。所以在這種情況下，最好在重泡脹后，將膠條轉移到另外一個電泳漕中進行電泳。為什么我在等電聚焦前加的礦物油在聚焦后
雙向電泳常見問題解答
隨著人類基因組草圖完成，蛋白質組研究全面展開。作為經典蛋白質組學分離技術，雙向電泳越來越被科研人員所熟知。但要想得到漂亮的雙向電泳譜圖，卻并不那么容易。我們將針對雙向電泳過程中常出現的問題進行總結，希望能給您的實驗帶來幫助。?本期我們重點關注雙向電泳圖譜中常出現的水平條紋。雙向電泳水平條紋的產生主要
雙向電泳常見問題解答
1. 出現垂直拖尾是什么原因？ 答：有可能是蛋白沒有被SDS充分包裹，適當延長平衡時間可以解決這個問題；另外也有可能是多余的DTT或者灰塵所致。 2. 為什么出現橫向條紋？ 答：有可能是聚焦不完全，需要根據膠條長度和PH范圍以及上樣量選擇合適的聚焦時間；另外也有可能是樣品提取及溶解和水化不完全的緣
水質分析常見問題解析
水質分析又稱水化學分析。即用化學和物理方法測定水中各種化學成分的含量。水質分析過程中常見的問題有哪些呢？?01、BOD緩沖劑液化了還能用嗎??答：BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象，這是正常情況，不影響使用。?02、我們測氨氮，是以氮元素計還是以銨根離子計??答:氨氮是指水中以游離氨和銨根離子形
水質分析常見問題解析
水質分析又稱水化學分析。即用化學和物理方法測定水中各種化學成分的含量。水質分析過程中常見的問題有哪些呢？01、BOD緩沖劑液化了還能用嗎?答：BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象，這是正常情況，不影響使用。02、我們測氨氮，是以氮元素計還是以銨根離子計?答:氨氮是指水中以游離氨和銨根離子形式存在的
引物合成常見問題解析
Q1.引物是如何合成的？ 目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種,無論采用什么機器合成，合成的原理都相同，主要差別在于合成產率的高低，試劑消耗量的不同和單個循環用時的多少。 (1) ? ?去保護：加入Deblocking脫去堿基上5'- OH的保護基團DMT，獲得游離
雙向電泳
實驗概要本實驗介紹了雙向電泳技術，先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到二維分布的蛋白質圖。實驗原理雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上
雙向電泳
蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心. 雙向電泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分離約1 000個E.coli蛋白，并表明蛋白質譜不是穩定的，而是隨環境而變化. 雙向電泳原理簡明，第一向進行等電聚焦，蛋白質沿pH梯度分離，至各自的等電點；隨后，再沿垂直的方向進行分子量
酸度計的常見問題解析
1、控制器無顯示？ 解決方法：檢查電源線是否接對，電源是否供上。 2、顯示數字上、下亂跳？ 解決方法：檢查周圍有無變頻器等干擾設備，注意要遠離這些干擾設備 或者做好屏蔽措施。 3、PH儀表不能校準？ 解決方法：標準溶液配制不正確或者電極損壞。 4、經過標準液PH4.00、PH6.86
血培養的臨床常見問題解析
血流感染（BSI）是指病原微生物侵入血流，隨血行播散的感染，可以表現為菌血癥、真菌血癥、病毒血癥和膿毒癥。血流感染是一種全身性感染疾病，嚴重者可引起休克、彌散性血管內凝血和多臟器功能衰竭。導管相關性血流感染（CRBSI）是指帶有血管內導管或者拔除血管內導管48小時內，患者出現菌血癥或真菌血癥，并伴有
雙向電泳操作步驟——雙向電泳操作步驟
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑
電泳槽常見問題解析
故障一、手工粘接電泳槽的鉑金電極孔處漏液 該處可能是因為電泳槽工作時間較長所至，對此應使用堵漏膠（稠合液）進行封堵即可。 故障二、模具水平電泳槽電極孔處漏液 檢查電極下的密封圈是否被螺絲擰緊在正確位置或已經損壞。如有損壞需更換密封膠圈。 故障三、電泳槽有機板粘接處漏液或開膠 有機板開膠
水質分析常見問題解析三
?請問做氨氮實驗時，為什么加入N3試劑出現大量白色渾濁，加入N2試劑后?下層紅色上層青色?不斷有小氣泡上升？答：鈣鎂離子高，應做絮凝沉淀預處理。 水樣帶色或渾濁以及含其他一些干擾物質，影響氨氮的測定。因此，在分析時需做適當的處理。對較清潔的水，可采用絮凝沉淀發；對污染嚴重的水或工業廢水，則用蒸餾法
水質分析常見問題解析二
請問bod營養鹽有黃色不溶物正常嗎？答：正常，營養鹽配好是淡黃色不完全溶解的溶液，用前需搖勻。?請問n2試劑前一天配出來沒什么問題，為什么放一天后變棕黃色變渾？答：n2試劑配好后應轉移到聚乙烯瓶中密封、避光、低溫儲存。如果放到礦泉水瓶內，時間稍長會出現變質。如果未密封保存，空氣中的有機氣體也會讓試劑
水質分析常見問題解析五
測定cod用密封管消解行不行？答：可以的，但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊，在顛倒搖勻的時候，可能會讓溶液灑出，導致測值結果不準，甚至可能會造成人身傷害；部分水樣在消解時會釋放大量的氣體，此種水樣不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解時會釋放出大量氯氣，密封消解會導致消解管內壓
水質分析常見問題解析四
?含氯酸鈉廢水COD如何檢測？ 答：含氯酸鈉廢水的COD檢測水樣的原水COD很高，用戶使用了氯酸鈉來處理，氯酸鈉具有氧化性，能降低COD，但這種廢水，使用正常方法無法檢測，經過查找資料及連華技術人員的建議，我們進行了方法測試，找到解決方案。 1）取2.5ml水樣，加入4.8ml的E試劑，注意速度
水質分析常見問題解析六
近COD檢測結果較以前低了很多，大概是什么原因？答：1、被污染，蒸餾水被污染導致偏高，此時需要更換蒸餾水。? ? 2、比色皿或反應管被污染，導致樣偏高，此時需重新清洗反應管與比色皿。? ? 3、曲線值被修改，出廠時曲線值為1505，用戶可通過恢復出廠設置，或按照說明書重新校正儀器。? ? 4.水樣本
凝膠過濾層析常見問題解析
樣品和選擇的填料不匹配待分離的樣品中目標物質和其它雜質的分子量小于2倍且都在選擇的填料的排阻極限之外或者之內。若樣品中目標物質的分子量和其它雜質的分子量小于2倍時，建議嘗試其它方法分離，反之選擇凝膠過濾層析時，填料的選擇應根據樣品中目標分子的大小選擇最接近（大或小都可以）目標分子排阻極限的填料進行分
載體構建實驗常見問題大解析
大家是否在實驗中經常遇到載體構建的各種問題，浪費大量的時間和精力，各種各樣的問題讓人頭疼，海創科業小編作為科研老司機特意為各位科研君整理了載體構建實驗常見問題及解決方法，希望能夠幫助到大家。1. ? ? ? PCR載體構建大部分時候都要通過PCR的方法獲取目的片段，擴增PCR的時候大家盡量選用高保真
雙向電泳的定義
雙向電泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pH分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心。雙向電泳由
雙向電泳的原理
蛋白質首先在薄條凝膠中通過等電聚焦分離。然后將凝膠水平放置在第二個平板狀凝膠上，通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質。水平分離反映了pI的差異；垂直分離反映了分子量的差異。因此，原始的蛋白質組成在兩個維度上擴散。使用雙向電泳技術可以分解數千種細胞蛋白質。可以從凝膠中切取出單個蛋白質點，并通過質譜
凝膠成像分析系統的常見問題解析
??? 大家在使用凝膠成像分析系統的過程中，會遇到一些疑問，有些是比較常見的，也就是大家普遍比較關心的問題，下面托普云農就就這些常見的問題來一一進行解答。? ? 1.如何調節焦距、聚焦、光圈以獲得高質量的圖片？? ? 凝膠成像分析系統上三個最重要的可調參數分別是焦距、聚焦和光圈。其中焦距調節清晰度，
氮吹儀的幾個常見問題解析
1、氮吹儀氮氣源應用是怎樣的?? 如使用量較大的話建議買一個氮氣發生器;? 檢測某些項目時氮吹儀是*的，使用高純氮氣便可;? 氣象的氮氣一般都是99.99%以上，氮氣使用2-3個便可。? 2、氮吹儀的四大優勢? 氮吹儀也叫自動快速濃縮儀，氮氣吹干儀等。目前，氮吹儀已經代替傳統的旋轉蒸發儀。
有關熔融指數儀常見問題的解析
溫度的準確性 國標規定，溫度穩定允差0.5℃，儀器盡管采用了電腦軟件控溫，消除了許多不穩定因素，但隨時間的流逝，傳感器及電子電路總有些許變化使穩定顯示值偏差。因此，要經常用專用校正溫度計進行校對。當實際溫度偏低時，熔體流動性變差，試驗值變小，但在正常情況下，如果偏離值不大（如小于0.5℃），對
雙向電泳實驗
試劑、試劑盒 尿素去污劑儀器、耗材 聚丙烯酰胺凝膠實驗步驟 一、第一向1. 等電聚焦凝膠的準備雙向電泳通常用聚丙烯酰胺凝膠作介質，但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非離子或兩性離子去污劑。為了增加樣品的可溶性，可加 0.5% CHAPS。在第一向電泳中，最重要的是用載體兩性電解
雙向電泳實驗
ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電
旋轉蒸發器常見問題解析
旋轉蒸發器的電動升降功能重要嗎?電動升降功能對旋蒸是錦上添花的效果。采購者從性價比、安全性、故障率等各方面綜合考慮的話大多數還是選手動升降，特別是有防爆要求顧客的幾乎不考慮電動升降。哪種真空泵適合我的旋蒸?真空泵是旋轉蒸發器必備的配套產品，蒸發低沸點有機溶劑通常真空度要求不高(一般來說低于0.4K
光纖熔接機常見問題解析
1、光纖能進行正常復位，進行間隙設置時光纖出現在屏幕上但停止不動，且屏幕顯示停止在“設置間隙”。 解決方法： （1）按壓“復位”鍵，使系統復位。 （2）打開防風罩，分別打開左、右壓板。順序進行下列檢查： （3）檢查是否存在斷纖。 （4）檢查光纖切割長度是否太短。 （5）檢查載纖槽與光
電導率儀常見問題解析
電導率儀，是實驗室測量水溶液電導率儀必備的儀器，它廣泛地應用于石油化工、生物醫藥、污水處理、環境監測、礦山冶煉等行業及大專院校和科研單位。若配用適當常數的電導電極，還可用于測量電子半導體、核能工業和電廠純水或超純水的電導率。 電導率的測量原理其實就是歐姆定律測定平行電極間溶液部分的電阻。但是，當電