植物組織蛋白質提取方法
1、植物組織蛋白質提取方法(summer)1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,樣品制備完成。蛋白質提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8) 45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g這種方法針對SDS-PAGE,垂直板電泳!2、植物組織蛋白質提取方法 (summer)三氯醋酸—丙酮沉淀法1、在液氮中研磨葉片2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜,然后離心(4℃8000rpm以上1小時)棄上清。3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%的β-巰基乙醇),搖勻后離心(4℃8000rpm以上1小時),然后真空干燥沉淀,備......閱讀全文
植物組織蛋白質提取方法
1、植物組織蛋白質提取方法(summer)1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清
植物組織蛋白質用什么方法提取
植物組織蛋白質提取方法三氯醋酸—丙酮沉淀法1、在液氮中研磨葉片2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜,然后離心(4℃8000rpm以上1小時)棄上清。3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%的β-巰基乙醇),搖勻后離心(4℃8000rpm以上1小時),然后真空干燥沉淀,備用。
植物組織蛋白質提取用什么方法
一、植物組織蛋白質提取方法1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清液,樣品制備完成
植物組織mRNA的提取方法
實驗概要本實驗介紹了植物組織mRNA的提取方法。實驗原理由于mRNA末端含有多poly(A) ,當總RNA流徑oligo(dT)纖維素時,在高鹽緩沖液作用下,mRNA被特異的吸附在oligo(dT)纖維素柱上,在低鹽濃度或蒸餾水中,mRNA可被洗下,經過兩次oligo(dT)纖維素柱,可得到較純的m
離心機用于植物組織蛋白質的提取
一、植物組織蛋白質提取方法(summer) 1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。 2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。 3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm
動植物組織mRNA提取實驗方法
一、材料? 水稻葉片或小鼠肝組織。? 二、設備? 研缽,冷凍臺式高速離心機,低溫冰箱,冷凍真空干燥器,紫外檢測儀,電泳儀,電泳槽。 三、試劑? 1、無RNA酶滅菌水:用將高溫烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小時)裝蒸餾水,然后加入0.01%的DEPC(體積/體積),處理過夜后高壓滅菌。? 2、
植物蛋白質的提取方法
植物蛋白質的提取方法基本上有這幾種:鹽析法、有機溶劑法和等電點法。1、鹽析法原理:鹽析法是指在藥物溶液中加入大量的無機鹽,使某些高分子物質的溶解度降低沉淀析出,而與其他成分分離的方法。鹽析法主要用于蛋白質的分離純化。常作鹽析的無機鹽有硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。2、有機溶劑法原理:機溶劑引起蛋白質沉淀
植物組織總RNA的提取
實驗概要由于RNA分子的結構特點,容易受RNA酶的攻擊反應而降解,加上RNA酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA酶,人的皮膚、手指、試劑、容器等均可能被污染,因此全部實驗過程中均需戴手套操作并經常更換(使用一
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質...
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)實驗實驗材料?植物組織試劑、試劑盒?苯酚提取緩沖液沉淀液等電聚焦緩沖液儀器、耗材?低溫粉碎機實驗步驟 3.1 蛋白質提取( 1 ) 新鮮植物組織在液氮中冷凍,然后在自動低溫粉碎機中預先冷卻的鋼杯中將材料研磨成細碎的粉末(見注釋 4) 。( 2 ) 在
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)
實驗材料植物組織試劑、試劑盒苯酚提取緩沖液沉淀液等電聚焦緩沖液儀器、耗材低溫粉碎機實驗步驟3.1 蛋白質提取( 1 ) 新鮮植物組織在液氮中冷凍,然后在自動低溫粉碎機中預先冷卻的鋼杯中將材料研磨成細碎的粉末(見注釋 4) 。( 2 ) 在一個 15 ml 的離心管(falcon? tube) 中加入
頑拗性植物組織的蛋白質組學研究(苯酚法提取蛋白質)
1. 前言提取蛋白質是蛋白質組學研究的第一步。植物組織的蛋白質含量較低,并且存在多種非蛋白質成分,如細胞壁及貯藏多糖、脂質和酚類化合物,使蛋白質的提取難度增大 。植物蛋白質的可溶性與它們的細胞內定位關系密切,傳統的蛋白質提取方法是用水合緩沖液、去垢劑或直接沉淀法 [1] 。除了普遍使用的 TCA
植物組織類樣本DNA提取完整解操作方法
植物DNA的提取和純化是植物基因工程研究的基礎操作。實施分子標記、基因圖譜、基因指紋圖譜、基因文庫構建、遺傳多態性分析、DNA重組、RAPD(隨機引物多態性DNA)、RFLP(限制性酶多態性)、基因分離及遺傳轉化和鑒定等都以提取DNA為前提。目前,對從植物組織中提取DNA方法的要求是:簡便、有效、快
組織mRNA提取方法
(一)總RNA提取-Trizol法Trizol法適用于人類、動物、植物、微生物的組織或培養細菌,樣品量從幾十毫克至幾克。用Trizol法提取的總RNA絕無蛋白和DNA污染。RNA可直接用于Northern斑點分析,斑點雜交, Poly(A)+分離,體外翻譯,RNase封阻分析和分子克隆。1、將組織在
動植物組織總RNA提取(Trizol法)和mRNA提取
一、材料 水稻葉片或小鼠肝組織。 二、設備 研缽,冷凍臺式高速離心機,低溫冰箱,冷凍真空干燥器,紫外檢測儀,電泳儀,電泳槽。 ? ?三、試劑 1、無RNA酶滅菌水:用將高溫烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小時)裝蒸餾水,然后加入0.01%的DEPC(體積/體積),處理過夜后高
植物組織RNA提取的難點及對策
植物組織RNA提取的難點及對策 從植物組織中提取RNA是進行植物分子生物學方面研究的必要前提。要進行Northern雜交分析,純化mRNA以用于體外翻譯或建立cDNA文庫,RT-PCR及差示分析等分子生物學研究,都需要高質量的RNA。因此,從植物組織中提取純度高、完整性好的RNA是順利進行上述研究
植物組織中DNA的提取與測定
一、原理 脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是一切生物細胞的重要組成成分,主要存在于細胞核中,鹽溶法是提取DNA的常規技術之一。從細胞中分離得到的DNA是與蛋白質結合的DNA,其中還含有大量RNA,即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開是技術的關鍵。D
植物組織RNA提取的要點與技巧
從植物組織中提取RNA 是進行植物分子生物學方面研究的必要前提。要進行Northern雜交分析,純化mRNA 以用于體外翻譯或建立cDNA文庫,RT-PCR及差示分析等分子生物學研究,都需要高質量的RNA 。因此,從植物組織中提取純度高、完整性好的RNA 是順利進行上述研究的關鍵所在。從文獻報道上看
提取植物rna方法
提到RNA的提取,是不是充滿了心酸和無奈呀,抽提過程中已十分小心謹慎了,但是有時候還是會出現RNA污染、降解的悲劇。別怕,今天小編給您介紹一種新的RNA提取方法,比以前的方法更快、更有效和更可靠,讓您從此不用再擔心的RNA的抽提了。 眾所周知:獲得純凈、完整的RNA樣品,是對一種植物的活性基因
高速冷凍離心機提取植物蛋白質方法
? 一、植物組織蛋白質提取方法 1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。 2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。 3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
高速冷凍離心機提取植物蛋白質方法
一、植物組織蛋白質提取方法 1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。 2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。 3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
組織RNA提取方法介紹
1. 最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0~4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后加入一定量的TRIZOL試劑,
組織破碎提取法的提取方法比較
提取方法優點缺點煎煮法經濟、安全、易行選擇性差、成分易破壞、后期處理困難回流法選擇性好、收率高受熱長、效率低、成分易破壞浸泡法簡單、投資小、安全效率低、耗時長、易變質蒸餾法選擇性強、處理方便適用范圍窄、需要專用設備滲漉法室溫、簡單、節能費時、有污染連續回流法省溶劑、效率高受熱長、規模小、成分易破壞超
木本植物蛋白質提取實驗
實驗材料樹皮 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒沉淀緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?漂洗緩沖液 ? ?
木本植物蛋白質提取實驗
實驗材料?樹皮試劑、試劑盒?沉淀緩沖液漂洗緩沖液溶解緩沖液儀器、耗材?離心管實驗步驟 3.1 提取總蛋白質 (見注釋 5)( 1 ) 將去塞的 10 ml 空離心管稱重。我們選用韌性好的聚碳酸酯旋蓋圓底高速離心管。( 2 ) 細胞碎裂:500 mg 新鮮組織(保存在 -80°C ) 在液氮中用研缽和
木本植物蛋白質提取實驗
實驗材料樹皮試劑、試劑盒沉淀緩沖液漂洗緩沖液溶解緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟3.1 提取總蛋白質 (見注釋 5)( 1 ) 將去塞的 10 ml 空離心管稱重。我們選用韌性好的聚碳酸酯旋蓋圓底高速離心管。( 2 ) 細胞碎裂:500 mg 新鮮組織(保存在 -80°C ) 在液氮中用研缽和杵搗成粉
植物組織的培養方法
1、非試管微組織快繁 非試管微組織快繁技術是將外植體(一般要求帶一葉一芽)放置在室內外普通沙子培養基上進行培養,利用植物腋芽自然倍增達到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生長出根系。此技術投資低,操作環節少。 2、試管組織培養 試管組織培養是將外植體(即離體組織、器官或細胞)放置在組培
石蠟包埋組織DNA提取方法
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義
提取動物組織DNA的方法
【實驗步驟】1.組織塊解凍,用生理鹽水洗去血污,剪取約0.5g組織,剪小放入2.0ml離心管中,用FM-200P研磨45秒;2.加入0.45ml TES混勻,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混勻后,于56°C保溫4-6h,每2h搖1次。3.放置到室溫,加入
蛋白質免疫印跡組織蛋白提取簡介
1)所需器材:制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管(最好高溫高壓處理)、一個大冰盒、一個1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高溫高壓處理)、新鮮組織或保存于-80℃冰箱組織、保存于4℃冰箱的PBS(最好高溫高壓處理)、移液槍、吸頭(最好高溫高壓處理)、兩套研磨棒(最好高溫高壓處理)、掌上離
谷類植物種子蛋白質提取實驗
實驗材料白蛋白 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?球蛋白 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒提取液 ? ? ?